应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 【求助/交流】土壤总DNA的离心柱纯化问题
81/1返回列表
查看: 2922  |  回复: 15
查看全部回帖@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
本帖产生 1 个 MicEPI ，点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

camel315

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】土壤总DNA的离心柱纯化问题

目前我在手工提取土壤总DNA的时候，需要用离心柱纯化DNA。DNA粗提液的OD260含量比较低，但230nm的杂质较多。我用Mobio公司的试剂盒就不存在这个问题，他们的离心柱的材质可能比较好，可以有效除去粗提液中的各种杂质。国内商用的纯化试剂盒一般只对PCR产物（或者说片段<10kb)的核酸比较有效，而对基因组DNA的纯化效率比较低(<50%,甚至<30%).各位虫友，有谁用过成熟的（硅胶或者树脂）离心柱，可以有效除杂（主要是腐殖酸和盐类）？不妨给点建议。
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

土壤微生物

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼2011-04-11 11:13:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

camel315

金虫 (小有名气)
bioteke的试剂盒我问了，50次的1500元，价格还是非常高的，而且不提供试用装。跟mobio的power soil DNA isolation kit差不多了。其实是基于zhou（1996）方法，加入了离心柱除杂步骤。但是他的离心柱不单卖。
赞一下 回复此楼
4楼2011-04-11 16:23:50
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

camel315

金虫 (小有名气)
其实这个东西对有机分析的人员来说，应该不是什么太难的问题。只是没人或者没有动力去弄这个。
赞一下 回复此楼
5楼2011-04-11 16:24:57
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

camel315

金虫 (小有名气)
不知哪位虫友知道，现在试剂盒中用到的硅胶膜的孔径或者颗粒是多大的？
赞一下 回复此楼
7楼2011-04-19 10:24:12
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

camel315

金虫 (小有名气)
谢谢热心人提供的信息
赞一下 回复此楼
9楼2011-04-26 10:15:50
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

camel315

金虫 (小有名气)
Mobio对腐殖土还是很对症的。也许你的样品中的微生物数量本来就少。如果是这样，可以考虑富集。同时考虑在提取前，60~65℃水域处理10分钟，提高裂解效率。
赞一下 回复此楼
11楼2011-07-06 09:22:08
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

camel315

金虫 (小有名气)
mobio有UltroClean和Power Soil DNA之分，后者对腐殖酸效果好。前者不是专门针对高腐殖酸土壤的。其次，它有一个troubleshooting，可以从上面找到一些解决的方法。
赞一下 回复此楼
14楼2011-07-24 09:53:42
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 camel315 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复(可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭