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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 【求助/交流】土壤总DNA的离心柱纯化问题
汕头大学海洋科学接受调剂
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camel315

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】土壤总DNA的离心柱纯化问题

目前我在手工提取土壤总DNA的时候，需要用离心柱纯化DNA。DNA粗提液的OD260含量比较低，但230nm的杂质较多。我用Mobio公司的试剂盒就不存在这个问题，他们的离心柱的材质可能比较好，可以有效除去粗提液中的各种杂质。国内商用的纯化试剂盒一般只对PCR产物（或者说片段<10kb)的核酸比较有效，而对基因组DNA的纯化效率比较低(<50%,甚至<30%).各位虫友，有谁用过成熟的（硅胶或者树脂）离心柱，可以有效除杂（主要是腐殖酸和盐类）？不妨给点建议。
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1楼 2011-04-11 11:13:23
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camel315

金虫 (小有名气)
Mobio对腐殖土还是很对症的。也许你的样品中的微生物数量本来就少。如果是这样，可以考虑富集。同时考虑在提取前，60~65℃水域处理10分钟，提高裂解效率。
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11楼2011-07-06 09:22:08
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mirror3895

铁杆木虫 (正式写手)
camel315(金币+1): 2011-07-07 09:39:32
我也想知道这个问题呢，期待高人的解答
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2楼2011-04-11 11:20:28
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天使托

专家顾问 (职业作家)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
wolfebst(金币+1): 谢谢您的参与 2011-04-11 12:24:39
camel315(金币+1): 2011-05-30 09:26:33
camel315(金币+1): 2011-07-07 09:39:19
你看看bioteke的这个多功能DNA试剂盒可以不？
http://www.bioteke.com/chn/showproduct.asp?id=176
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3楼2011-04-11 11:49:36
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camel315

金虫 (小有名气)
bioteke的试剂盒我问了，50次的1500元，价格还是非常高的，而且不提供试用装。跟mobio的power soil DNA isolation kit差不多了。其实是基于zhou（1996）方法，加入了离心柱除杂步骤。但是他的离心柱不单卖。
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4楼2011-04-11 16:23:50
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