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camel315

金虫 (小有名气)


[交流] 【求助/交流】土壤总DNA的离心柱纯化问题

目前我在手工提取土壤总DNA的时候,需要用离心柱纯化DNA。DNA粗提液的OD260含量比较低,但230nm的杂质较多。我用Mobio公司的试剂盒就不存在这个问题,他们的离心柱的材质可能比较好,可以有效除去粗提液中的各种杂质。国内商用的纯化试剂盒一般只对PCR产物(或者说片段<10kb)的核酸比较有效,而对基因组DNA的纯化效率比较低(<50%,甚至<30%).各位虫友,有谁用过成熟的(硅胶或者树脂)离心柱,可以有效除杂(主要是腐殖酸和盐类)?不妨给点建议。
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camel315

金虫 (小有名气)


Mobio对腐殖土还是很对症的。也许你的样品中的微生物数量本来就少。如果是这样,可以考虑富集。同时考虑在提取前,60~65℃水域处理10分钟,提高裂解效率。
11楼2011-07-06 09:22:08
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mirror3895

铁杆木虫 (正式写手)


camel315(金币+1): 2011-07-07 09:39:32
我也想知道这个问题呢,期待高人的解答
2楼2011-04-11 11:20:28
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★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
wolfebst(金币+1): 谢谢您的参与 2011-04-11 12:24:39
camel315(金币+1): 2011-05-30 09:26:33
camel315(金币+1): 2011-07-07 09:39:19
你看看bioteke的这个多功能DNA试剂盒可以不?
http://www.bioteke.com/chn/showproduct.asp?id=176
3楼2011-04-11 11:49:36
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camel315

金虫 (小有名气)


bioteke的试剂盒我问了,50次的1500元,价格还是非常高的,而且不提供试用装。跟mobio的power soil DNA isolation kit差不多了。其实是基于zhou(1996)方法,加入了离心柱除杂步骤。但是他的离心柱不单卖。
4楼2011-04-11 16:23:50
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