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夏尔list

金虫 (著名写手)

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[交流] 【求助/交流】PCR一个月了没啥结果

ddH2O                         15.5
5×Buffer                         5
10毫摩尔引物             0.5/0.5
2.5mMdNTP                      2
cDNA                               1
高保真酶prime STAR          0.5

产物1314bp，98℃    5min
                     98℃    10s
                     58℃    15s
                     72℃    1min30s 30个循环
                     4℃    hold
梯度设置了，58没错，普通taq酶有条带，但是高保真酶扩不出来，求教各位大侠。

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1楼 2011-03-26 15:36:38

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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

★ ★ ★ ★
夏尔list(金币+1):谢谢参与
看天(金币+3): 鼓励 2011-03-27 09:16:43

这么久，变通一下啊。。。

既然taq能扩出来那就用taq扩增，然后连载体送去测序。

如果不幸发生了点突变，那再设计引物突变回来就OK了。

不管用什么方法，做出来就是王道。。。

PS：下次再看到你的发帖我就不进来了，我对你的头像过敏。。。有点慎得慌

[ Last edited by brightfuture01 on 2011-3-26 at 15:51 ]