24小时热门版块排行榜    

查看: 11972  |  回复: 15
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

未知树

木虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】质粒,酶切前比酶切后跑的还快,神了??!!! 已有11人参与

最近做酶切,遇到一个非常神奇的事情。 希望大家能够解释下,非常感谢!

用试剂盒提取了质粒,用不同的酶进行单酶切。结果发现:
1,线性化的质粒,大小与理论值相符合。
2,原质粒,竟然比酶切后线性化都跑得快???!!
PS:原质粒是用QIANGEN质粒抽提试剂盒提取的,应该是没有问题的。
但是,为什么质粒会跑的这么快啊!
质粒大小3341bp,  却跑到了2500bp左右。
难道说,超螺旋能够跑这么快? 并且,电泳显示,提取的质粒只有一条带(一般都是三条带)。

M,1,2,3,4,5,6,7

M:DNA marker
1, 1号质粒单酶切Afl II;  2, 1号质粒单酶切EcoRV; 3, 1号质粒单酶切Not I
4, 2号质粒单酶切Afl II;  5, 2号质粒单酶切EcoRV; 6, 2号质粒单酶切Not I
7,2号原质粒(没有酶切)


[ Last edited by 未知树 on 2011-3-15 at 18:41 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

每一天都是一个新的起点
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

未知树

木虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by 天使托 at 2011-03-15 10:59:06:
很正常啊!超螺旋本身就跑的比较快!

啊,但是,我提取的质粒,怎么就只有超螺旋一种形式啊?一般而言,都是三条带,即使提取质量高,也是超螺旋多点儿。
现在的情况是,看不到另外两条带,只有超螺旋一条带了。
是因为提取的效果好,不是因为别的吗?

实在是不明白啊
请帮忙分析下,万分感谢。。。。。。。。。
每一天都是一个新的起点
5楼2011-03-15 18:38:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 16 个回答

huzhihong-

新虫 (小有名气)


★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
rainwander(金币+3): 鼓励新虫积极参与交流~~~ 2011-03-15 23:24:40
这很正常,由于质粒的性质,酶切前全部是超螺旋状态酶切后为线性,超螺旋比线性跑的快···
2楼2011-03-15 00:02:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
很正常啊!超螺旋本身就跑的比较快!
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
4楼2011-03-15 10:59:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
rainwander(金币+2): 鼓励积极参与交流~~~ 2011-03-15 23:24:49
引用回帖:
Originally posted by 未知树 at 2011-03-15 18:38:14:
啊,但是,我提取的质粒,怎么就只有超螺旋一种形式啊?一般而言,都是三条带,即使提取质量高,也是超螺旋多点儿。
现在的情况是,看不到另外两条带,只有超螺旋一条带了。
是因为提取的效果好,不是因为别 ...

理论上确实是三条带,超螺旋,螺旋,线性。但是实际情况下并不是总会是三条带,我见的最多的是两条带,一条带也有啊!
其实你酶切一下只要质粒大小对就可以了,没有必要在乎是否是一条带的!
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
6楼2011-03-15 19:39:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 06:42 by ZvyPK8n6Nfki
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 06:34 by ZvyPK8n6Nfki
[找工作] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 06:28 by ZvyPK8n6Nfki
[考博] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 06:18 by ZvyPK8n6Nfki
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-28 23:46 by b8fCuTHqckEt
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 4/200 2026-09-28 23:19 by b8fCuTHqckEt
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 3/150 2026-09-28 23:12 by b8fCuTHqckEt
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 CfXuS1rDhLYN 2026-09-28 4/200 2026-09-28 22:55 by ez6fGg9abYaj
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 4/200 2026-09-28 22:55 by ez6fGg9abYaj
[博后之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 5/250 2026-09-28 22:45 by ez6fGg9abYaj
[有机交流] 同一个分子,一条来自文献,一条来自AI——不告诉你答案,你会选哪条? +3 tianxiaoxian 2026-09-28 6/300 2026-09-28 22:44 by tianxiaoxian
[找工作] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 5/250 2026-09-28 22:32 by ez6fGg9abYaj
[公派出国] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 4/200 2026-09-28 22:28 by ez6fGg9abYaj
[博后之家] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 3/150 2026-09-28 22:21 by ez6fGg9abYaj
[考博] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 6/300 2026-09-28 22:15 by ez6fGg9abYaj
[论文投稿] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 CfXuS1rDhLYN 2026-09-28 3/150 2026-09-28 19:08 by 9lS3ad5oOymn
[考研] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 4/200 2026-09-28 18:51 by 9lS3ad5oOymn
[找工作] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 4/200 2026-09-28 17:30 by ZYXdhzDAy9ZX
[教师之家] 某top大学教授说“能够在市场中兑现的能力才是真能力”无比同意! +7 zju2000 2026-09-26 8/400 2026-09-28 16:42 by beefly
[教师之家] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 3/150 2026-09-28 15:32 by ZYXdhzDAy9ZX
信息提示
请填处理意见