应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】有关毕赤酵母
151/1返回列表
查看: 1680  |  回复: 14
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

匿名

用户注销 (初入文坛)
本帖仅楼主可见

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

tomato895

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2011-03-11 23:04:08
已阅   同方向广播   申请MolEPI   回复此楼   编辑   删除   查看我的主页

gongeleven

铁杆木虫 (正式写手)
★
李喜鹏198705(金币+5):谢谢参与
看质粒图谱，没切到关键部位就可以啊，
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2011-03-11 23:34:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhengfan1109

银虫 (正式写手)
★ ★ ★
李喜鹏198705(金币+5):谢谢参与
lstt09nk(金币+2): 欢迎常来~~希望你的回答对楼主有所帮助 2011-03-12 09:41:10
质粒线性化时用SglII，转入KM71 中，但是操作手册上说KM71用SacI这个酶，

首先，你可以用Sal I切，这样你的问题就没了。
如果没有这种酶，使用Sg影响与否应该要看它会把目的序列切了吗。
如果没有，应该没有问题的。
赞一下(2人) 回复此楼
4楼2011-03-12 00:30:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

phoenix211

金虫 (小有名气)
★
李喜鹏198705(金币+5):谢谢参与
只要这个酶不会把你的目的基因切断，并且可以把质粒上需要发生重组的部分切开就可以了。质粒上除了手册上推荐的那几个线性化位点，还有好几个替换位点。
赞一下(1人) 回复此楼
8楼2011-03-12 01:28:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

susizheng

木虫 (著名写手)
★
李喜鹏198705(金币+5):谢谢参与
看天: 除非楼主本人要求，否则没有相应版规依据来处理 2011-03-12 12:56:52
选择操作手册上几个推荐的酶切位点吧，如果推荐的几个酶切位点在你的基因中存在，再考虑其他。
PS：楼上有用表情刷积分的，希望斑竹严肃处理。
另外楼主以后悬赏金币最好手动发放。

[ Last edited by susizheng on 2011-3-12 at 10:00 ]
赞一下(2人) 回复此楼
10楼2011-03-12 09:58:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liang33231

银虫 (小有名气)
★
李喜鹏198705(金币+5):谢谢参与
说实话 金币吸引了我  呵呵··· 帮顶··
赞一下(1人) 回复此楼
11楼2011-03-12 13:02:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

worm2010

金虫 (小有名气)
★
李喜鹏198705(金币+5):谢谢参与
如果你的目的基因中没有该酶切位点的话，就没什么影响，首先保证这个线性化酶不能把你的目的基因切断才行
赞一下(1人) 回复此楼
12楼2011-04-19 10:27:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lizhijiang

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
做一下对比实验吧，要不下面的工作就白做了。
赞一下(1人) 回复此楼
13楼2011-04-19 16:39:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tomato895

银虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5): 给个红包，谢谢回帖
送鲜花一朵
我也遇到了同样的问题，推荐的酶切位点在目的基因上出现，然后选择了重组基因上的其他一个酶切位点，不知道结果会如何。楼主现在进展如何？
赞一下 回复此楼
14楼2012-03-13 07:00:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小丹木木

荣誉版主 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5): 给个红包，谢谢回帖
肯定有问题了，毕赤酵母是同源重组，如果线性化的位置不对，是不能得到较好的转化子的，还是要按照操作手册来啊
赞一下 回复此楼
15楼2012-03-13 10:25:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
一直寻觅2楼
2011-03-11 23:15   回复  
李喜鹏198705(金币+5):谢谢参与
wolaiye5楼
2011-03-12 00:56   回复  
李喜鹏198705(金币+5):谢谢参与
ruiazi6楼
2011-03-12 01:04   回复  
李喜鹏198705(金币+5):谢谢参与
ruiazi7楼
2011-03-12 01:05   回复  
zyxme9楼
2011-03-12 02:40   回复  
李喜鹏198705(金币+5):谢谢参与
相关版块跳转 我要订阅楼主 李喜鹏198705 的主题更新
151/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂 +4 苦命人。。。 2026-04-18 4/200 2026-04-19 02:01 by 烟雨流涯
[考研] 一志愿沪9，326求生物学调剂 +12 刘墨墨 2026-04-13 12/600 2026-04-18 23:31 by 路病情
[考研] 化学070300 求调剂 +29 哈哈哈^_^ 2026-04-12 29/1450 2026-04-18 15:56 by Equinoxhua
[考研] 22408 312求调剂 +24 门路摸摸 2026-04-14 26/1300 2026-04-18 13:04 by wunaiy88
[考研] 304求调剂 +7 castLight 2026-04-16 7/350 2026-04-17 20:05 by 关一盏灯cd
[考研] 295分求调剂 +5 ?要上岸? 2026-04-17 5/250 2026-04-17 16:51 by fenglj492
[考研] 294求调剂 +7 淡然654321 2026-04-17 8/400 2026-04-17 16:36 by wutongshun
[考研] 297，工科调剂?河南农业大学本科 +14 河南农业大学-能 2026-04-14 14/700 2026-04-16 14:41 by dingyanbo1
[考研] 279学硕食品专业求调剂院校 20+7 孤独的狼爱吃羊 2026-04-12 29/1450 2026-04-16 09:00 by screening
[考研] 求调剂推荐 +8 小聂爱学习 2026-04-14 8/400 2026-04-16 07:22 by 学员JpLReM
[考研] 297，工科调剂? +10 河南农业大学-能 2026-04-14 10/500 2026-04-15 21:50 by noqvsozv
[考研] 085404 22408 309分求调剂 +9 lzmk 2026-04-14 10/500 2026-04-15 20:02 by 学员JpLReM
[考研] 通信工程求调剂！！！ +6 zlb770521 2026-04-14 6/300 2026-04-15 20:00 by 学员JpLReM
[考研] 085801电气专硕272求调剂 +19 电气李 2026-04-13 21/1050 2026-04-15 13:37 by 黑科技矿业
[考研] 297工科调剂? +14 河南农业大学-能 2026-04-13 15/750 2026-04-15 13:25 by 黑科技矿业
[考研] 085408光电信息工程专硕355一志愿长春光机所调剂 +6 王ymaa 2026-04-13 13/650 2026-04-14 11:33 by 王ymaa
[考研] 245求调剂 +6 冰糖橘?汽水 2026-04-13 10/500 2026-04-14 10:49 by jyl0317
[考研] 085600材料与化工349分求调剂 +16 李木子啊哈哈 2026-04-12 17/850 2026-04-14 09:11 by fenglj492
[考研] 考研英一数一338分 +9 长江大学东校区 2026-04-13 10/500 2026-04-14 00:41 by 王珺璞
[考研] 302求调剂 +10 易！? 2026-04-13 10/500 2026-04-13 19:04 by lbsjt
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭