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匿名

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tomato895

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1楼 2011-03-11 23:04:08
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小丹木木

荣誉版主 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5): 给个红包，谢谢回帖
肯定有问题了，毕赤酵母是同源重组，如果线性化的位置不对，是不能得到较好的转化子的，还是要按照操作手册来啊
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15楼2012-03-13 10:25:39
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gongeleven

铁杆木虫 (正式写手)
★
李喜鹏198705(金币+5):谢谢参与
看质粒图谱，没切到关键部位就可以啊，
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3楼2011-03-11 23:34:31
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zhengfan1109

银虫 (正式写手)
★ ★ ★
李喜鹏198705(金币+5):谢谢参与
lstt09nk(金币+2): 欢迎常来~~希望你的回答对楼主有所帮助 2011-03-12 09:41:10
质粒线性化时用SglII，转入KM71 中，但是操作手册上说KM71用SacI这个酶，

首先，你可以用Sal I切，这样你的问题就没了。
如果没有这种酶，使用Sg影响与否应该要看它会把目的序列切了吗。
如果没有，应该没有问题的。
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4楼2011-03-12 00:30:30
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phoenix211

金虫 (小有名气)
★
李喜鹏198705(金币+5):谢谢参与
只要这个酶不会把你的目的基因切断，并且可以把质粒上需要发生重组的部分切开就可以了。质粒上除了手册上推荐的那几个线性化位点，还有好几个替换位点。
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8楼2011-03-12 01:28:14
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