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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 【求助/交流】关于PCR问题，请多指教！
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meisme.2006

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】关于PCR问题，请多指教！ 已有6人参与

我现在要扩一个4k多的DNA片段，我晕，这么大，扩了很久都没有带，请问各位有没有什么好的建议！谢谢
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1楼 2011-02-24 23:05:45
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blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★
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翱宇(金币+1): 鼓励交流 2011-03-05 14:52:12
如果楼主能拿到BAC，会更简单些，primer star保真酶扩增应该不成问题！再有，4k也不算长片段，LA应该能扩出来，我们实验室用这个酶扩过9K
的片段也没问题。
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jiayoubashaonian
4楼2011-03-05 14:08:50
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献
★ ★ ★
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lstt09nk(金币+2): 辛苦 2011-02-24 23:18:12
大片段的扩增引物设计比较重要，还有就是要用高效的酶。

GC含量高么？

实在不行就一段一段扩增，然后用融合PCR拼接。
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The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
2楼2011-02-24 23:13:28
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lcy1971

银虫 (小有名气)
★
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4k也不算太长，LA Taq就行。
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3楼2011-03-05 12:06:50
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cjl2fl

金虫 (正式写手)
是不是引物有问题么？这么长还可以吧。还是链接问题呢？不会没有任何条带的呀？
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5楼2011-03-05 15:56:37
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