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meisme.2006

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】关于PCR问题,请多指教! 已有6人参与

我现在要扩一个4k多的DNA片段,我晕,这么大,扩了很久都没有带,请问各位有没有什么好的建议!谢谢
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blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★
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翱宇(金币+1): 鼓励交流 2011-03-05 14:52:12
如果楼主能拿到BAC,会更简单些,primer star保真酶扩增应该不成问题!再有,4k也不算长片段,LA应该能扩出来,我们实验室用这个酶扩过9K
的片段也没问题。
jiayoubashaonian
4楼2011-03-05 14:08:50
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+2): 辛苦 2011-02-24 23:18:12
大片段的扩增引物设计比较重要,还有就是要用高效的酶。

GC含量高么?

实在不行就一段一段扩增,然后用融合PCR拼接。
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
2楼2011-02-24 23:13:28
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lcy1971

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
4k也不算太长,LA Taq就行。
3楼2011-03-05 12:06:50
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cjl2fl

金虫 (正式写手)

是不是引物有问题么?这么长还可以吧。还是链接问题呢?不会没有任何条带的呀?
5楼2011-03-05 15:56:37
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