24小时热门版块排行榜    

查看: 1260  |  回复: 9

huala2013

银虫 (著名写手)

[求助] PCR出现这样的问题,如何解决? 已有4人参与

PCR跑不出条带来,一片弥散,出现这样的问题,该怎么解决?急急急!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

youlinglyw

荣誉版主 (著名写手)

一匡天下

优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-03-04 11:53:20
huala2013: 金币+2, ★★★很有帮助 2014-03-04 11:59:02
你这是根本没扩出来

我都郁闷了一段时间

可能原因
1模板的问题
2引物的问题
3条件的问题
如果你的条带跑不出孔来,是1和2
如果跑出来,是2和3
天行健
2楼2014-03-04 11:47:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuren2009

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-03-04 11:53:27
huala2013: 金币+2, ★★★很有帮助 2014-03-04 11:59:12
只分析结果,首先你要从Marker来判断跑胶有没有问题,胶没问题就去分析你的PCR引物,试剂,模版,PCR程序。一般情况下是引物不够好。
学习使你立于不败之地
3楼2014-03-04 11:50:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huala2013

银虫 (著名写手)

引物都是文献报道的,条件也是按照文献说的做的,只有1个带有条带,其他就是没有条带,烦啊!
4楼2014-03-04 11:54:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huala2013

银虫 (著名写手)

我把图片传下。

» 本帖附件资源列表

  • 欢迎监督和反馈:小木虫仅提供交流平台,不对该内容负责。
    本内容由用户自主发布,如果其内容涉及到知识产权问题,其责任在于用户本人,如对版权有异议,请联系邮箱:xiaomuchong@tal.com
  • 附件 1 : PCR结果.jpg
  • 2014-03-04 11:57:52, 19 K
5楼2014-03-04 11:57:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西门吹雪170

荣誉版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
huala2013: 金币+2, ★★★很有帮助 2014-03-04 14:58:32
可能你的模板合成的不好,也可能有基因组污染,建议先提高退火温度试试
植根于内心的修养;无需提醒的自觉;以约束为前提的自由;为别人着想的善良
6楼2014-03-04 11:57:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

reallpf

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
huala2013: 金币+2, ★★★很有帮助 2014-03-04 14:59:54
引用回帖:
4楼: Originally posted by huala2013 at 2014-03-04 11:54:58
引物都是文献报道的,条件也是按照文献说的做的,只有1个带有条带,其他就是没有条带,烦啊!

文献里公布的引物,特别是特异引物,就没几个靠谱的。文献里能够采用的只有通用引物可行性比较大。
7楼2014-03-04 12:06:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuren2009

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
huala2013: 金币+2, ★★★很有帮助 2014-03-04 14:58:47
引用回帖:
4楼: Originally posted by huala2013 at 2014-03-04 11:54:58
引物都是文献报道的,条件也是按照文献说的做的,只有1个带有条带,其他就是没有条带,烦啊!

全部按照文献来做的话,具体到实际会有很多控制不到的条件,比如实验室仪器(PCR仪),试剂还有差别呢,用别人的引物来扩增你的模版跑不出来也不是稀罕事。看你的图应该是结合度不好。
学习使你立于不败之地
8楼2014-03-04 12:58:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

文献里公布的引物,是他自己根据自己的序列设计的,你的序列跟他的不一定完全一样,在别的区域有可能不好。
9楼2014-03-04 14:36:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huala2013

银虫 (著名写手)

谢谢大家!大家觉得这种情况,下一步如何做好?
10楼2014-03-04 14:59:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 huala2013 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +6 yuleib84 2026-08-18 7/350 2026-08-18 15:02 by sytp
[教师之家] 两姐妹,一个辛辛苦苦30岁工作当大学教师,另一个23岁就工作当开车教练 +3 瞬息宇宙 2026-08-11 5/250 2026-08-18 14:55 by LNP@mRNA
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +46 医学老男孩 2026-08-13 102/5100 2026-08-18 14:41 by qinwangshen
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +14 archvillain 2026-08-15 26/1300 2026-08-18 13:37 by phantomgost
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +13 Ldrop2023 2026-08-13 16/800 2026-08-18 12:25 by 淀粉搬运工
[基金申请] 2027广东省杰青 +3 奶牛小黑 2026-08-15 8/400 2026-08-18 11:47 by gltch
[论文投稿] 投稿咨询 +4 wwm09 2026-08-17 5/250 2026-08-18 11:25 by 無關想念
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +5 基诺咪客 2026-08-17 6/300 2026-08-18 11:06 by hunter无悔
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +6 angus9576 2026-08-17 11/550 2026-08-17 23:57 by angus9576
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +8 wangze12014 2026-08-14 10/500 2026-08-17 17:05 by xter9665
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +8 zju2000 2026-08-16 9/450 2026-08-17 12:20 by lmz0216
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 26/1300 2026-08-16 12:35 by 启萌科技
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
信息提示
请填处理意见