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急，求各位帮忙分析原因，关于pcr与跑胶的问题 已有2人参与
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各位虫友大家好，本人刚接触做水稻QTL的课题，在pcr与连续聚丙烯凝胶电泳时出现问题了，请给位帮忙分析原因，在此先谢谢了。 我做的目标DNA片段大约50bP左右。pcr体系分别为： ddH2O 3.2ul 混合酶（买的） 5ul（每分钟扩增1-2kB，预混loading buffer装) 引物 1ul 模板DNA 0.8ul PCR参数： 94度 5min 94度 45s 55度 45s 72度 90s 72度 7min 4度 无穷 聚丙烯酰胺凝胶电泳配置(每板）： H20 30ml 母液（40%丙烯酰胺） 6ml 50xTAE缓冲液 300ul 10% APS 300ul TEMED 25ul 上样量1.6ul 电压120v 90min 结果有的可以跑出条带，有的模糊不清，几乎没有，还有拖带现象，具体如下图所示，三图来自不同的三种引物。 DNA样，混合酶等问题可以排除，请问还可能问题出在哪？是引物的问题吗？  不能跑出.jpg  不能跑出条带.jpg  可以跑出条带.jpg |
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