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[交流]
【求助/交流】菌落PCR扩出来的片段不是目的片段，咋办啊？？？？已有6人参与
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| 今天两次菌落PCR，扩出来的片段都不是目的片段。最初P的是菌的16S，用的是通用引物27F和1492R，扩出来1500bp左右的16S片段，然后将PCR产物切胶回收纯化，并且已检测了回收产物，是1500左右。然后做连接，连接到pMD19—T载体上，转化JM109感受态，次日，平板上长出菌落，白斑居多，蓝斑数个，挑取白斑做菌落PCR，引物用M13，电泳检测PCR产物，条带居然在500bP处！！！吓我一跳！我做了两次了，两次一共挑了19个白斑了，扩出来都是500bp的。怎么回事啊这是？？？？？请大侠们解释一下。感激涕零！！！！ |
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