| 查看: 1079 | 回复: 4 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
【求助/交流】菌液PCR问题 已有4人参与
|
|||
|
各位大仙给个意见，我最近想筛CDNA文库，挑了180个斑，前100多个摇了菌后PCR的结果都不错，可后几十个怎么都扩不出来。 补充的是，我都是200转摇了6-7个小时，而且我摇出来的菌大多时间放在4°，共4、5天，并且我在准备PCR的时候菌在室温下放的时间也比较长，每次扩都放2、3个小时。这些是不是有影响，而且我有检测了一下我最初扩出的菌现在又扩增不出来了。郁闷，我刚刚接触分子方面的实验，请帮我找找原因，不胜感激！！ |
回复此楼» 猜你喜欢
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有226人回复
-
湖北师范大学招调剂啦
已经有9人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
-
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生
已经有0人回复
-
317分 一志愿江南大学 化学工程学硕 求调剂
已经有6人回复
-
化工申博
已经有3人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 【求助/交流】构建质粒问题
已经有8人回复
- 【求助/交流】大家帮忙看一张电泳图
已经有11人回复
- 【求助/交流】革兰氏阳性菌PCR问题
已经有7人回复
- 【求助/交流】3'RACE 结果有问题～～～
已经有8人回复
- 【求助/交流】有关克隆方面的问题
已经有4人回复
- 【求助/交流】关于农杆菌菌液PCR
已经有13人回复
- 【求助/交流】菌液PCR的经验
已经有6人回复
- 【求助/交流】DNA连接前后大小一样咋回事?
已经有5人回复
- 【求助/交流】菌液测序问题
已经有10人回复
- 【求助/交流】细菌基因组为模板做pcr的问题
已经有5人回复
- 【求助/交流】有关菌液PCR的问题
已经有14人回复
- 【求助/交流】克隆测序无信号
已经有14人回复
- 【求助/交流】转化中出现的奇怪现象
已经有11人回复
5楼2010-12-04 16:26:28
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+3):good 2010-12-04 08:22:16
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+3):good 2010-12-04 08:22:16
|
normally I follow this protocol E. coli Colony PCR 1. Pick colony with toothpick and swirl into 25 μl of TE (or dH2O) in microfuge tube. 2. Heat in boiling water bath for 2 minutes (can be used directly for PCR). 3. Spin for 2 minutes at top speed in microfuge. 4. Transfer 20 μl of supernatant to new microfuge tube. 5. Use 1-2 μl as template in 25 μl PCR reaction. in my hands it works well maybe your culture concentration is too high, which affects the PCR reaction |
2楼2010-12-04 00:34:11
zhangxn2010
木虫 (著名写手)
让一切随风飞翔
- MolEPI: 1
- 应助: 14 (小学生)
- 金币: 2450.9
- 散金: 923
- 红花: 7
- 帖子: 2880
- 在线: 284小时
- 虫号: 972619
- 注册: 2010-03-16
- 专业: 神经生物学
3楼2010-12-04 09:40:58
