24小时热门版块排行榜    

查看: 2185  |  回复: 11
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

panl234

银虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】基因克隆时,酶切有结果,PCR却P不出来 已有6人参与

从九月初开始一直在做基因克隆,目的片段981bp,载体用的是pcDNA3.0(原先师姐已经插入了一个981bp的片段),我把载体重新酶切,连上自己的片段,从cDNA得到的片段是981bp,就是到验证时片段就变成了750bp,特别亮,十分特异!但酶切还是有981bp的带,是哪布出了问题?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

panl234

银虫 (正式写手)

多谢!
我也很想直接去测序,都做了两遍了!可是老板一看PCR结果就说:不能测!谢谢你的建议
4楼2010-11-13 16:30:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

yuhuimeiye

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
楼主,你把你的目的序列与载体序列进行一下比对,看其是否有相似序列,如果没有,请核实一下你的引物,如果引物能扩增的片段也是981bp,就再考虑一下你扩增时候延伸时间是否达到一分钟。最后,建议楼主进行测序,无论是扩增还是酶切验证,都是粗略的,最真实的还是测序,建议直接测序。
2楼2010-11-13 14:42:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

leo_stu

铁虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
拿载体做实验前还是先测序下。
-------------------------Science,Cell,Nature---------------
3楼2010-11-13 16:22:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

panl234

银虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by leo_stu at 2010-11-13 16:22:18:
拿载体做实验前还是先测序下。

载体测序?有什么意义?
5楼2010-11-13 16:31:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 今天放榜吗? +12 布布和一二 2026-08-19 12/600 2026-08-19 13:45 by gloomy6159
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +8 ziyangfang 2026-08-19 9/450 2026-08-19 13:08 by blacksandy
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +8 kkkl_v 2026-08-19 8/400 2026-08-19 12:34 by Vivilian
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +52 医学老男孩 2026-08-13 115/5750 2026-08-19 12:09 by 医学老男孩
[基金申请] 2027广东省杰青 +4 奶牛小黑 2026-08-15 10/500 2026-08-19 11:02 by wanfengnew
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +10 基诺咪客 2026-08-17 14/700 2026-08-19 10:34 by 基诺咪客
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +8 启萌科技 2026-08-12 30/1500 2026-08-19 10:22 by 启萌科技
[基金申请] 快农历七夕节了,轻松一下,男人悄悄话,女施主请不要进来。 +6 Tide man 2026-08-14 7/350 2026-08-19 09:56 by ZJTJZ
[基金申请] 什么时候开奖? +6 CrisMessi 2026-08-18 6/300 2026-08-19 08:06 by Equinoxhua
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +4 Tide man 2026-08-12 5/250 2026-08-19 07:41 by 201120518022
[教师之家] 为什么余额宝的年化利率越来越低?主要原因有哪些? +3 瞬息宇宙 2026-08-15 3/150 2026-08-18 21:40 by xiaohuixin
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[论文投稿] 投稿咨询 +4 wwm09 2026-08-17 6/300 2026-08-18 15:36 by wwm09
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +14 archvillain 2026-08-15 26/1300 2026-08-18 13:37 by phantomgost
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +6 angus9576 2026-08-17 11/550 2026-08-17 23:57 by angus9576
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +8 wangze12014 2026-08-14 10/500 2026-08-17 17:05 by xter9665
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
信息提示
请填处理意见