24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 1913  |  回复: 11
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

panl234

银虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】基因克隆时,酶切有结果,PCR却P不出来 已有6人参与

从九月初开始一直在做基因克隆,目的片段981bp,载体用的是pcDNA3.0(原先师姐已经插入了一个981bp的片段),我把载体重新酶切,连上自己的片段,从cDNA得到的片段是981bp,就是到验证时片段就变成了750bp,特别亮,十分特异!但酶切还是有981bp的带,是哪布出了问题?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

leo_stu

铁虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
拿载体做实验前还是先测序下。
-------------------------Science,Cell,Nature---------------
3楼2010-11-13 16:22:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

yuhuimeiye

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
楼主,你把你的目的序列与载体序列进行一下比对,看其是否有相似序列,如果没有,请核实一下你的引物,如果引物能扩增的片段也是981bp,就再考虑一下你扩增时候延伸时间是否达到一分钟。最后,建议楼主进行测序,无论是扩增还是酶切验证,都是粗略的,最真实的还是测序,建议直接测序。
2楼2010-11-13 14:42:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

panl234

银虫 (正式写手)

多谢!
我也很想直接去测序,都做了两遍了!可是老板一看PCR结果就说:不能测!谢谢你的建议
4楼2010-11-13 16:30:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

panl234

银虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by leo_stu at 2010-11-13 16:22:18:
拿载体做实验前还是先测序下。

载体测序?有什么意义?
5楼2010-11-13 16:31:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂材料科学与工程一志愿985初试365分 +4 材化李可 2026-04-08 4/200 2026-04-09 08:46 by 5268321
[考研] 286求调剂 +19 Faune 2026-04-08 20/1000 2026-04-09 08:36 by 哦哦123
[考研] 070300化学学硕311分求调剂 +17 梁富贵险中求 2026-04-04 18/900 2026-04-08 22:53 by may_新宇
[考研] 机械工程264学硕求调剂 +3 qiushangxian 2026-04-06 3/150 2026-04-08 01:53 by Linzejun
[考研] 362求调剂 +8 我要考大 2026-04-06 12/600 2026-04-08 00:32 by JourneyLucky
[考研] 080100力学316求调剂 +3 L_Hairui 2026-04-07 3/150 2026-04-07 23:26 by JourneyLucky
[考研] 318求调剂 +5 李青山山山 2026-04-07 5/250 2026-04-07 18:24 by 蓝云思雨
[考研] 312求调剂 +18 gtw1 2026-04-06 20/1000 2026-04-07 18:16 by 蓝云思雨
[考研] 一志愿西电085401求调剂 +4 sunw1306 2026-04-07 4/200 2026-04-07 16:40 by 啵啵啵0119
[考研] 085602调剂 初试总分335 +10 19123253302 2026-04-05 10/500 2026-04-07 15:23 by 小乔同学ya
[考研] 319分085702安全工程求调剂 +6 rious 2026-04-05 6/300 2026-04-07 09:42 by jp9609
[考研] 男生,一志愿沪9生物学071000,初试308求调剂 +3 刘墨墨 2026-04-04 3/150 2026-04-05 08:26 by barlinike
[考研] 344材料与化工调剂 +9 调剂上岸玘 2026-04-03 9/450 2026-04-04 23:10 by happyddm
[考研] 331求调剂 +3 niby 2026-04-02 3/150 2026-04-04 19:56 by 蓝云思雨
[考研] 复试调剂 +6 范根培 2026-04-04 6/300 2026-04-04 14:27 by 土木硕士招生
[考研] 怎么删帖子啊 +3 缝曦1000 2026-04-04 3/150 2026-04-04 14:20 by 土木硕士招生
[考研] 285求调剂 +5 AZMK 2026-04-03 8/400 2026-04-03 18:17 by AZMK
[考研] 283求调剂 +3 jiouuu 2026-04-03 4/200 2026-04-03 13:28 by jiouuu
[考研] 312求调剂 +6 小小墨123 2026-04-02 7/350 2026-04-03 07:32 by jsw79
[考研] 一志愿武汉理工0856,初试334 +3 26考研材料 2026-04-02 3/150 2026-04-02 21:22 by dongzh2009
信息提示
请填处理意见