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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】这种PCR结果是为什么
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wangy0908

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】这种PCR结果是为什么

这段时间做的pcr,在1%的gel电泳。重复了几次都是密散的。
是做的Inverse PCR, 酶切后自连接，自连接的DNA用量是10ng，50ul体系。取2ul做第一次pcr， 第一次PCR产物稀释200倍，取2ul做第二次pcr。图片就是第二次pcr产物。第一次的pcr产物电泳没有任何结果。
请教各位高人指点指点！！
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1楼2010-11-11 03:16:59
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wangy0908

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by blackrose8089 at 2010-11-12 13:01:06:

如果是这样的话，楼主不妨换下刘老师的TAIL PCR技术，如果是用的拟南芥T-DNA插入的话，Salk institute有现成的引物可参考一下！

我用的是大豆材料。突变是由元缘杂交引起的。不知道是插入还是缺失！
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15楼2010-11-12 22:09:11
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randomqd

木虫 (小有名气)

有可能是loading

wangy0908(金币+1): 2010-11-11 19:57:37
看一下上样buf有没有问题。。。
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2楼2010-11-11 08:31:35
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magy2006

木虫 (著名写手)
wangy0908(金币+1): 2010-11-11 19:43:40
模板浓度极高外加循环数极多
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3楼2010-11-11 08:37:36
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aaron2012

银虫 (初入文坛)
下次建议时间跑长点  你看Marker都没有完全分开
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4楼2010-11-11 09:33:23
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