应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】连接产物，是否可以直接做PCR模板？
51/1返回列表
查看: 3513  |  回复: 17
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

dqvictory

铁虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】连接产物，是否可以直接做PCR模板？ 已有10人参与

请教各位大侠：
    T4酶要不要先灭活其中的T4连接酶？Buffer中的离子对PCR反应有影响吗？如果需要的话，要怎样进行纯化呢？
    谢谢啦！
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

有价值的生物经验贴

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
把记忆随身携带！
1楼 2010-10-27 11:56:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献
引用回帖:
Originally posted by amilie030312 at 2010-10-27 14:04:42:
我也想知道楼主为啥要把链接产物做PCR，如果连成线性的估计引物一条设计在载体上一条设计在目的序列上应该可以进行PCR，环状的如果连完了能P吗？好像除了做滚环的P酶别的办法吧。

呵呵，环状的当然能P啊。否则反向PCR是咋做的？你又不是要复制整个质粒，而是P其中的一个片段。否则你连接到T载体上去测序，你以为是怎么测得呢？
赞一下 回复此楼
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
9楼2010-10-27 14:12:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 18 个回答

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
连接产物为什么要直接做PCR呢…………我倒是好奇这个问题
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2010-10-27 12:42:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ben1147

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-10-27 12:42:17:
连接产物为什么要直接做PCR呢…………我倒是好奇这个问题

估计是想看看有没有连上的，要是没连上就不做转化了，毕竟转化比较费时间，哈哈
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2010-10-27 12:48:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ben1147

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+2):good！ 2010-10-27 19:56:18
PCR产物3‘是羟基，载体5’是磷酸，这个地方是连上的。PCR产物5‘是羟基，载体的3’也是羟基，这个地方应该是没连上的吧，不知道Taq酶能不能过去，我瞎猜的哈
赞一下(2人) 回复此楼
4楼2010-10-27 12:51:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 18 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 290求调剂 +6 @将就将就看 2026-03-10 11/550 2026-03-17 10:22 by @将就将就看
[考研] 本人考085602 化学工程 专硕 +15 不知道叫什么！ 2026-03-15 17/850 2026-03-17 10:13 by Sammy2
[考研] 293求调剂 +5 zjl的号 2026-03-16 6/300 2026-03-17 10:13 by zhyzzh
[考研] 材料与化工304求B区调剂 +7 邱gl 2026-03-11 8/400 2026-03-17 09:36 by 努力学习赚彩礼
[考研] 271求调剂 +11 生如夏花… 2026-03-11 13/650 2026-03-17 09:02 by 雾散后相遇lc
[考研] 0703化学336分求调剂 +3 zbzihdhd 2026-03-15 4/200 2026-03-16 23:52 by zbzihdhd
[考研] 304求调剂 +4 ahbd 2026-03-14 4/200 2026-03-16 16:48 by 我的船我的海
[考研] 318求调剂 +3 Yanyali 2026-03-15 3/150 2026-03-16 16:41 by houyaoxu
[考研] 085600调剂 +5 漾漾123sun 2026-03-12 6/300 2026-03-16 15:58 by 漾漾123sun
[考研] 0856求调剂 +3 刘梦微 2026-03-15 3/150 2026-03-16 10:00 by houyaoxu
[考研] 327求调剂 +6 拾光任染 2026-03-15 11/550 2026-03-15 22:47 by 拾光任染
[考研] 297一志愿上交085600求调剂 +5 指尖八千里 2026-03-14 5/250 2026-03-14 17:26 by a不易
[基金申请] 面上和青基一样限30页不合理 +5 wowsunflower 2026-03-10 7/350 2026-03-14 17:21 by kingkocxr
[考研] 297求调剂 +4 学海漂泊 2026-03-13 4/200 2026-03-14 11:51 by 热情沙漠
[考研] 331求调剂（0703有机化学 +5 ZY-05 2026-03-13 6/300 2026-03-14 10:51 by Jy?
[考研] 一志愿华中农业大学071010，总分三百二,求调剂 +3 困困困困坤坤 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:35 by JourneyLucky
[考研] 318求调剂 +3 李新光 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:21 by JourneyLucky
[考研] 复试调剂 +9 Copy267 2026-03-10 9/450 2026-03-13 23:45 by userper
[考研] 279求调剂 +3 Dizzy123@ 2026-03-10 3/150 2026-03-13 23:02 by JourneyLucky
[考研] 336求调剂 +6 Iuruoh 2026-03-11 6/300 2026-03-13 22:06 by JourneyLucky
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭