版块导航: 正在加载中...

客户端APP下载

登录注册

应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜

>论坛更新日志 (4175)
>虫友互识 (3925)
>留学DIY (2460)
>留学生活 (1767)
>海外博后 (1376)
>育儿交流 (1192)
>医药类考试 (973)
>材料综合 (812)
>海归之家 (808)
>第一性原理 (627)
>我与小木虫的故事 (603)
>地学 (603)
>转基因 (591)
>复合材料 (591)
>人文社科 (589)
>信息科学 (588)

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

dqvictory

铁虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 492.5
帖子: 76
在线: 13.3小时
虫号: 622230
注册: 2008-10-10
性别: GG
专业: 实验动物学

[交流] 【求助/交流】连接产物，是否可以直接做PCR模板？已有10人参与

请教各位大侠：
T4酶要不要先灭活其中的T4连接酶？Buffer中的离子对PCR反应有影响吗？如果需要的话，要怎样进行纯化呢？
谢谢啦！

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

有价值的生物经验贴

» 猜你喜欢

含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松已经有0人回复
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析已经有0人回复
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费? 已经有171人回复
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析已经有0人回复
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析已经有0人回复
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析已经有0人回复
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析已经有0人回复
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析已经有0人回复
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点已经有0人回复
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂已经有0人回复

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

求助：约6kb质粒做模板的pcr程序怎么设定啊已经有12人回复
高保真酶PCR产物连接pMD-19T载体，DH5a感受态，怎么总是连接不上已经有26人回复
胶回收产物连接转化后菌液PCR电泳条带出现问题已经有8人回复
【求助/交流】质粒DNA可以不通过酶切直接跑电泳检测吗？已经有24人回复
【求助/交流】pGEM-T Easy载体 T-A 连接为啥没连入PCR产物的菌斑是蓝斑已经有23人回复
【求助/交流】为什么我的PCR产物总是连接不上T载体已经有26人回复
【求助/交流】做连接后的质粒是否可以用来做pcr 已经有10人回复
【求助/交流】连接产物转化后菌落PCR正确，提取的质粒却比空质粒还小？已经有4人回复
【求助/交流】PCR产物连接请教！已经有5人回复
【求助/交流】PCR产物作为模板已经有11人回复
【求助/交流】模板浓度对PCR的影响已经有4人回复
【求助/交流】细菌基因组为模板做pcr的问题已经有5人回复
【求助/交流】以连接产物做模板扩增此连接产物，有问题请教各位达人~麻烦您帮忙分析下已经有9人回复
【求助/交流】PCR产物与T载体的连接的实验原理？已经有5人回复

把记忆随身携带！

1楼 2010-10-27 11:56:13

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

MolEPI: 14
应助: 24 (小学生)
贵宾: 1.2
金币: 113343
散金: 1526
红花: 224
沙发: 1
帖子: 28965
在线: 3720.9小时
虫号: 464575
注册: 2007-11-21
性别: GG
专业: 神经生物学

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):鼓励交流。 2010-10-27 13:37:47

是可以的，但是其中一条引物要用载体上的序列来设计，通常用载体上的通用引物来做，另一端可以选载体上的序列，也可以选插入片段远端的序列来做。

祝好运

赞一下(2人)

The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.

7楼2010-10-27 13:35:49

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

查看全部 18 个回答

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

MolEPI: 7
应助: 1 (幼儿园)
贵宾: 0.021
金币: 7298.5
散金: 9
红花: 13
帖子: 4032
在线: 224.7小时
虫号: 551611
注册: 2008-04-27
性别: GG
专业: 神经系统肿瘤（含特殊感受

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流

连接产物为什么要直接做PCR呢…………我倒是好奇这个问题

赞一下(1人)

2楼2010-10-27 12:42:17

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

ben1147

木虫 (正式写手)

MolEPI: 1
应助: 18 (小学生)
贵宾: 0.003
金币: 5847.6
红花: 6
帖子: 952
在线: 116.9小时
虫号: 709538
注册: 2009-02-26
专业: 微生物生理与生物化学

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流

引用回帖:

Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-10-27 12:42:17:
连接产物为什么要直接做PCR呢…………我倒是好奇这个问题

估计是想看看有没有连上的，要是没连上就不做转化了，毕竟转化比较费时间，哈哈

赞一下(1人)

3楼2010-10-27 12:48:30

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

ben1147

木虫 (正式写手)

MolEPI: 1
应助: 18 (小学生)
贵宾: 0.003
金币: 5847.6
红花: 6
帖子: 952
在线: 116.9小时
虫号: 709538
注册: 2009-02-26
专业: 微生物生理与生物化学

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+2):good！ 2010-10-27 19:56:18

PCR产物3‘是羟基，载体5’是磷酸，这个地方是连上的。PCR产物5‘是羟基，载体的3’也是羟基，这个地方应该是没连上的吧，不知道Taq酶能不能过去，我瞎猜的哈

赞一下(2人)

4楼2010-10-27 12:51:26

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

查看全部 18 个回答

最具人气热帖推荐 [查看全部]		作者	回/看	最后发表

	[博后之家] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3	6GojgJvkDudM 2026-08-16	6/300	2026-08-17 13:58 by EYK67XJMj64E
	[考博] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3	6GojgJvkDudM 2026-08-16	4/200	2026-08-17 13:49 by EYK67XJMj64E
	[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +7	wangze12014 2026-08-14	8/400	2026-08-17 12:45 by a441914426
	[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜？ +12	Ldrop2023 2026-08-13	13/650	2026-08-17 12:33 by gltch
	[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3	i7NFEVbjQMM5 2026-08-16	4/200	2026-08-17 12:10 by 4GBAYCdVQoK3
	[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3	6GojgJvkDudM 2026-08-16	3/150	2026-08-17 09:49 by xLVPIRuSvCUe
	[论文投稿] 岩土工程学报什么时候才能终审完呐 25+3	yeager111 2026-08-10	4/200	2026-08-16 20:42 by tfang
	[基金申请] 时间戳又变了8-15 +13	archvillain 2026-08-15	25/1250	2026-08-16 20:13 by zhaosm1982
	[基金申请] 2027广东省杰青 +3	奶牛小黑 2026-08-15	6/300	2026-08-16 20:07 by 奶牛小黑
	[基金申请] 快农历七夕节了，轻松一下，男人悄悄话，女施主请不要进来。 +3	Tide man 2026-08-14	3/150	2026-08-16 17:47 by jurkat.1640
	[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7	启萌科技 2026-08-12	26/1300	2026-08-16 12:35 by 启萌科技
	[精细化工] 招聘金属平磨液，抛光液研发工程师 +3	小天0311 2026-08-14	3/150	2026-08-16 07:31 by H9PLUS
	[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果？ +4	yuleib84 2026-08-11	4/200	2026-08-14 23:05 by lfy8008
	[硕博家园] 读博的好处 +4	lnee 2026-08-11	4/200	2026-08-14 10:20 by ahsoarli
	[基金申请] filecode +15	documentary 2026-08-10	17/850	2026-08-14 10:08 by kissu88
	[基金申请] 重要来源：本周末出结果 +10	瞬息宇宙 2026-08-12	10/500	2026-08-13 15:46 by likettle
	[基金申请] Filecode 又变了，巨变 +3	WH3796 2026-08-12	4/200	2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
	[基金申请] 结合人工智能，周易传统文化，filecode打分制来了，3分以上希望很大。 +3	Tide man 2026-08-12	4/200	2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
	[基金申请] 帮忙看看fileCode +7	wwncly 2026-08-10	13/650	2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
	[基金申请] 什么时候出结果，有咨询渠道？？？ +3	Tide man 2026-08-11	3/150	2026-08-11 17:54 by kudofaye