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【求助/交流】求教蛋白高手 已有3人参与
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这几天在摆弄全抗表达，由于没有经验第一次表达时，做的SDS-PAGE胶并且用的也是变性的上样缓冲液，煮过之后上样SDS-PAGE电泳并western blot检测，结果只显示了重链大小的条带，师兄们说是变性使轻重链解开了，这个抗体只检测到重链没有检测到轻链，应该跑非变性胶，所有的缓冲液都是不能加SDS和巯基乙醇。 按照师兄的提示做了非变性电泳及检测并用上次的样做了对照，可是结果挺奇怪了，貌似全抗大小的片段出现了，而上次的对照却没有条带出现。 高手帮忙解释一下，还有个问题求教：我有轻重链DNA知道其序列，分别克隆到载体上表达后形成全抗，怎么计算其全抗的大小及其pI |
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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):热心虫友。 2010-10-18 20:52:04
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