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【求助/交流】求教蛋白高手
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金虫
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[交流]
【求助/交流】求教蛋白高手
已有3人参与
这几天在摆弄全抗表达,由于没有经验第一次表达时,做的SDS-PAGE胶并且用的也是变性的上样缓冲液,煮过之后上样SDS-PAGE电泳并western blot检测,结果只显示了重链大小的条带,师兄们说是变性使轻重链解开了,这个抗体只检测到重链没有检测到轻链,应该跑非变性胶,所有的缓冲液都是不能加SDS和巯基乙醇。
按照师兄的提示做了非变性电泳及检测并用上次的样做了对照,可是结果挺奇怪了,貌似全抗大小的片段出现了,而上次的对照却没有条带出现。
高手帮忙解释一下,还有个问题求教:我有轻重链DNA知道其序列,分别克隆到载体上表达后形成全抗,怎么计算其全抗的大小及其pI
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行到水穷处,坐看云起时!
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2010-10-15 14:49:57
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小木虫(金币
+0.5
):给个红包,谢谢回帖交流
scelab(金币+2):谢谢交流 2010-10-18 21:39:09
翻译成氨基酸序列,利用DNAman 分力量和等电点可以一次算出来
貌似我在木虫中已不只一次介绍过具体做法了。搜搜以前的回帖吧。
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4楼
2010-10-18 18:59:48
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高手都去哪儿了,还是我说的不清楚?
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行到水穷处,坐看云起时!
2楼
2010-10-18 16:24:25
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小木虫(金币
+0.5
):给个红包,谢谢回帖交流
你好,能否加我QQ交流下,我想请教你个问题,好吗
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3楼
2010-10-18 17:37:01
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):给个红包,谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):热心虫友。 2010-10-18 20:52:04
http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=2431408&fpage=0&view=&highlight=&page=2
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5楼
2010-10-18 20:44:48
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