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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】有关菌落PCR问题
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aaron2012

银虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】有关菌落PCR问题 已有5人参与

今天挑单克隆挑了10个，然后摇菌4个半小时进行菌落PCR，PCR后电泳，结果尽然每个克隆都出现两条相同的带，一条在500左右，一条200左右。目的片段在800左右。我觉得如果我挑的不是单克隆，也不会那么巧，每次挑的时候都挑到一样的杂菌啊，PCR条件94度5min,94度1min,51度1min,72度1min,72度10min.请教各位大侠指教为什么会出现这种情况。
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生物，特别是分子生物，贵在坚持！
1楼 2010-09-17 21:24:15
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外太空的猫

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
会不会是引物设计的特异性不改哇？
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2楼2017-07-09 17:32:37
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HZAUAS

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
考虑有没有可能是污染了

发自小木虫Android客户端
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3楼2017-07-09 19:04:23
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030Selma

金虫 (正式写手)
引物可能不特意

发自小木虫IOS客户端
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4楼2017-07-10 08:23:38
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kissmet

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
这很大概率就是非特异性扩增了
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5楼2017-07-10 15:44:08
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PattyGao

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
在软件上评分一下你的引物，可能特异性不行
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6楼2017-07-11 09:58:26
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