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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】质粒提取
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434744419

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】质粒提取 已有5人参与

最近做质粒提取走也出不来!天根和Axgen的质粒小提都用过！我做的是表达载体的质粒提取! 如果是拷贝数太低的话，应该用什么方法啊！
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1楼 2010-08-28 20:14:21
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hkfgwww

银虫 (正式写手)
★
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引用回帖:
Originally posted by 434744419 at 2010-08-28 20:14:21:
最近做质粒提取走也出不来!天根和Axgen的质粒小提都用过！我做的是表达载体的质粒提取! 如果是拷贝数太低的话，应该用什么方法啊！

可以合并浓缩啊，在过柱子之前将几管上清合并到一个柱子上。
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微生物发酵
2楼2010-08-28 21:08:15
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syn1985

木虫 (正式写手)
★ ★
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amisking(金币+1):鼓励交流！ 2010-08-28 21:41:41
引用回帖:
Originally posted by 434744419 at 2010-08-28 20:14:21:
最近做质粒提取走也出不来!天根和Axgen的质粒小提都用过！我做的是表达载体的质粒提取! 如果是拷贝数太低的话，应该用什么方法啊！

不知道你用的是什么菌种，一般如果质粒的拷贝数低的话都需要现提出来再次转染大肠杆菌，扩大培养再提一般都够用。
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3楼2010-08-28 21:29:34
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leezz

铜虫 (小有名气)

愤青
★
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首先看你的是什么菌株, 大肠还是放线菌， 提取的方法是不一样的，要是低拷贝的质粒可以多取些菌液。
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4楼2010-08-28 22:06:58
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ikaren2013

金虫 (小有名气)
★ ★
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silicare(金币+1):谢谢参与 2010-08-28 23:02:15
1.多一些菌液提取？
2.重新活化菌种。琼脂糖平板划线？
3.重新转化？
从1到3排除原因，逐一试。以上仅供参考，祝您实验顺利！
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5楼2010-08-28 22:53:40
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silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主
★
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什么质粒，什么菌，一点也提不出来吗
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6楼2010-08-28 23:03:12
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