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xiaomu3811

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】各位大侠:我最近克隆一转运蛋白基因,假如基因成功克隆 已有10人参与

各位大侠:我最近克隆一转运蛋白基因,假如基因成功克隆了,我是不是应该验证该基因以及功能?或者 各位大侠 给点克隆完基因以后该怎么做的建议....谢谢...
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月月大可

木虫 (著名写手)

★ ★ ★
xiaomu3811(金币+1):谢谢参与
lstt09nk(金币+2):这冷水泼的~~呵呵,不过膜蛋白确实很不好做~~ 2010-08-11 12:33:23
呵呵
我来给楼主泼一盆凉水吧。

转运蛋白在我的概念中都是膜蛋白!!!!
在此理论上楼主会遇到第一个难题:
1、如果是真核膜蛋白在原核中要么不表达,要么表达量很低。体外验证功能难啊。
2、表达了。哼哼,膜蛋白极强的疏水性出来包涵体的可能性很大!

目前为止使用原核表达真核膜蛋白验证功能的例子我是没见过。当然楼主如果使用真核表达系统(酵母或者昆虫)验证功能还是有希望的。
当然楼主如果做RNAi或者其他方面的功能试验,就当我没说。


呵呵  祝好运。

[ Last edited by 月月大可 on 2010-8-9 at 17:34 ]
10楼2010-08-09 17:32:54
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idealhy

金虫 (小有名气)


xiaomu3811(金币+1):谢谢参与
我感觉你克隆成功之后肯定要做的就是体外表达,和功能鉴定。
最关键的目的要看你自己想研究的方向是什么,这个蛋白的主要功能和什么重要的转运通路有关,然后再慢慢朝感兴趣的方向走。。
2楼2010-08-09 16:05:50
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xiaomu3811(金币+1):谢谢参与
祝福。。。
3楼2010-08-09 16:22:58
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seahow

木虫 (著名写手)


xiaomu3811(金币+1):谢谢参与
功能是肯定要做的,否则你克隆她干什么?
4楼2010-08-09 16:24:51
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