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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】pNPG测酶活
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your2007

至尊木虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】pNPG测酶活 已有15人参与

我用pNPG测酶活，我的酶促反应液在反应过程中没有颜色变化，加了碳酸钠马上变成黄色溶液，不知道怎么回事啊，应该是在没有加入碳酸钠之前就应该有水解产物对硝基苯酚生成啊，期望知道的说说谢谢了
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爱人者被爱，敬人者人敬
1楼 2010-07-06 16:00:34
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zemin_fang

木虫 (正式写手)
★
lstt09nk(金币+1):欢迎多多交流~ 2010-07-06 20:21:36
引用回帖:
Originally posted by your2007 at 2010-07-06 17:37:43:

嗯，我的反应条是酸性（pH4.5）下进行的，我加入2ml,0.5M的碳酸钠。不过，我用pH6.0的缓冲液也试过，这个在碳酸钠加入之前就能够看到溶液逐渐变黄色。这是为什么呢。谢谢!

并不是非要求pH>7才会显色的，没有那么苛刻。但是你加入碳酸钠以后pH都会在11左右，这样可以保证不同pH条件下最终pH一致
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5楼2010-07-06 19:39:40
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zemin_fang

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
看天(金币+1):谢谢交流 2010-07-06 17:38:09
your2007(金币+6):很是谢谢你啊。 2010-07-06 17:40:02
你的反应体系的pH是不是<7??
对硝基酚在碱性条件下才会形成可见的黄色，加入1M碳酸钠的目的就是将反应体系中的pH调整到碱性，让其显色，同时又可以终止酶反应。
赞一下(4人) 回复此楼
2楼2010-07-06 16:09:45
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your2007

至尊木虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by zemin_fang at 2010-07-06 16:09:45:
你的反应体系的pH是不是<7??
对硝基酚在碱性条件下才会形成可见的黄色，加入1M碳酸钠的目的就是将反应体系中的pH调整到碱性，让其显色，同时又可以终止酶反应。

嗯，我的反应条是酸性（pH4.5）下进行的，我加入2ml,0.5M的碳酸钠。不过，我用pH6.0的缓冲液也试过，这个在碳酸钠加入之前就能够看到溶液逐渐变黄色。这是为什么呢。谢谢!
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爱人者被爱，敬人者人敬
3楼2010-07-06 17:37:43
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silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主
★
your2007(金币+1):谢谢参与
路过，学习学习，
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4楼2010-07-06 17:47:58
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