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wosudongyang

铜虫 (初入文坛)

[求助] 酶活测定中的缓冲液 已有3人参与

大家好,我在准备测几个酶的酶活,当中要配几个缓冲液,网上配制缓冲液的方法太多太乱了,想问一下大神这几种缓冲液的配制方法?
    顺道问下在配酶的溶液的过程中是否是要用相应测酶活体系的缓冲液去溶解?多谢大家啦
0.1M pH7.8 Tris-HCl缓冲液
0.1M pH7.2 三乙醇胺缓冲液
0.1M pH6.8 磷酸钾缓冲液
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zhangcan159

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我只能回答一个,就是如果配置母液的话不需要,因为测定时稀释就可以达到蛋白反应的体系了,如果直接测的话需要。另外好像第一个缓冲液是配好0.1M的Tris,然后用盐酸调一下ph就可以了
走自己的路,让别人说去吧!
2楼2014-03-14 13:11:29
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daibingling

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

配酶的溶液的不需要用相应测酶活体系的缓冲液去溶解,只需用三蒸水稀释就可以了,因为储备液就是用一些盐离子配置的,这个问题我曾经也迷茫,后来咨询过后一直用三蒸水,没问题
3楼2014-03-15 08:58:34
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拉风蜗牛王

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

配酶的溶液不需要反映体系的缓冲液,因为酶在活力最大的情况下不一定最稳定,当然用也问题不大。但如果需要长期保存备用,那么建议还是查一查该酶的相关文献,一般产品说明书上也会有的。个人还是建议现配先用,直接用反应时的缓冲液配制!
4楼2014-03-15 09:09:48
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小小lois

新虫 (初入文坛)

请问楼主找到配制方法了吗,求赐教
5楼2015-06-14 15:04:03
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