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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 测定蛋白酶的最适PH值的方法
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yanghu8602

铜虫 (小有名气)

[求助] 测定蛋白酶的最适PH值的方法已有4人参与

测定蛋白酶最适PH值得方法，一般测定蛋白酶PH为2-12的缓冲液各是什么？以及浓度？是否用相应PH缓冲液溶解酪素作为底物？谢谢
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1楼2014-01-15 17:40:51
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liuyuexinfei

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
50mM，2-12的范围太大了，一般用hepes,tris，磷酸盐，乙酸盐，可以查看sigma的缓冲液范围目录
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我选择，我喜欢；我喜欢我的选择。
2楼2014-01-17 15:43:00
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yxncas-2012

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你选择酪素，应该还是选择测定酶活的专一底物比较好吧！
用测定酶活的方法，设定一系列pH buffer，看在那个范围酶活最好，在此基础做细的优化！
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3楼2014-01-18 16:29:36
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s10058043

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
wizardfan: 金币+2, 应助指数+1, 谢谢分享经验 2014-01-21 10:35:47
我通常做的peptide assay:
25 mM Tris-HCl, pH 7.4, 10 mM MgCl2, 1 mM ATP, 1 mM DTT
看你的蛋白适合哪个受质
10 mM Peptide substrate
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4楼2014-01-20 22:17:12
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yang0071

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

找文献看
先看综述
再看较老的经典的文献
最后定稿
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5楼2014-01-21 10:31:24
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