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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 酶活测定中的问题
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小小小90

银虫 (初入文坛)

[交流] 酶活测定中的问题

求教。。。。本人新手,最近在做蔗糖代谢相关酶活性测定,有几个问题想请教大家::

（1）.做酸/中性转化酶测定时,是加0.2mL酶液+0.8mL酶反应液,反应30min后,加1mLDNS试剂反应5min显色,最后定容至10mL测OD值,计算公式是
酶活力=C*Vt*n/Fw*t*Vs这里的n是提取液测定的稀释倍数,这里到底指多少啊 ? ? ?有另外的酶活性结果计算方法吗？

（2）.粗酶液透析袋透析后,体积发生变化,要不要定容至同一体积 ？？用蒸馏水定吗？

3.用的是杀死的酶液做对照，但是结果测出来和没杀死酶液的实验组相差不大!反而是没加底物蔗糖的有差距，文献上说是用杀死的酶液做对照，那没加底物蔗糖做对照行不行，那可能是什么问题？？？

4.有一种方法是硫酸铵盐析测酶活性的，那么这种方法结果怎么计算呢？？

一直没做出来,试剂配置什么的没有问题,最近都快崩溃了 也不知道是哪出了问题，，，，劳烦高手赐教～～  不胜感激～～

大家有没有已经成熟详细的蔗糖代谢相关酶活性的测定方法，，跪求发我1025197961@qq.com
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1楼 2014-08-29 10:03:09
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小小小90

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by dmbb at 2014-08-29 10:28:53

能不能来点实际的啊
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5楼2014-08-29 10:51:07
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小小小90

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cxjzly2008 at 2014-08-29 10:24:47

来点实际的好吗？
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6楼2014-08-29 10:52:09
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小小小90

银虫 (初入文坛)
跪求 高手帮忙，大家互相帮助 非诚勿扰，，大家帮忙解答一下 知道多少 告诉我多少哈～
赞一下 回复此楼
8楼2014-08-29 11:03:41
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pys5003

至尊木虫 (文坛精英)
好主意的
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10楼2014-08-29 11:17:01
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a8787744

新虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
转化酶直接间苯二酚法测可不可以》？
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11楼2014-10-22 15:00:23
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脆卷旺

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
您好，请问您是做什么作物的，您的具体测定方法是什么样的？
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12楼2014-12-15 19:33:38
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cxjzly20082楼
2014-08-29 10:24   回复  
小小小90(金币+1): 谢谢参与
dmbb3楼
2014-08-29 10:28   回复  
小小小90(金币+1): 谢谢参与
zimoruyan4楼
2014-08-29 10:40   回复  
小小小90(金币+1): 谢谢参与
kiss200855377楼
2014-08-29 10:58   回复  
小小小90(金币+1): 谢谢参与
tzynew9楼
2014-08-29 11:10   回复  
小小小90(金币+1): 谢谢参与
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