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酶活测定中的问题
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求教。。。。本人新手,最近在做蔗糖代谢相关酶活性测定,有几个问题想请教大家:: （1）.做酸/中性转化酶测定时,是加0.2mL酶液+0.8mL酶反应液,反应30min后,加1mLDNS试剂反应5min显色,最后定容至10mL测OD值,计算公式是 酶活力=C*Vt*n/Fw*t*Vs这里的n是提取液测定的稀释倍数,这里到底指多少啊 ? ? ?有另外的酶活性结果计算方法吗？ （2）.粗酶液透析袋透析后,体积发生变化,要不要定容至同一体积 ？？用蒸馏水定吗？ 3.用的是杀死的酶液做对照，但是结果测出来和没杀死酶液的实验组相差不大!反而是没加底物蔗糖的有差距，文献上说是用杀死的酶液做对照，那没加底物蔗糖做对照行不行，那可能是什么问题？？？ 4.有一种方法是硫酸铵盐析测酶活性的，那么这种方法结果怎么计算呢？？ 一直没做出来,试剂配置什么的没有问题,  最近都快崩溃了 也不知道是哪出了问题，，，，劳烦高手赐教～～ 不胜感激～～大家有没有已经成熟详细的蔗糖代谢相关酶活性的测定方法，，跪求发我1025197961@qq.com |
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