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小小小90

银虫 (初入文坛)


[交流] 酶活测定中的问题

求教。。。。本人新手,最近在做蔗糖代谢相关酶活性测定,有几个问题想请教大家::

(1).做酸/中性转化酶测定时,是加0.2mL酶液+0.8mL酶反应液,反应30min后,加1mLDNS试剂反应5min显色,最后定容至10mL测OD值,计算公式是
酶活力=C*Vt*n/Fw*t*Vs这里的n是提取液测定的稀释倍数,这里到底指多少啊 ? ? ?有另外的酶活性结果计算方法吗?

(2).粗酶液透析袋透析后,体积发生变化,要不要定容至同一体积 ??用蒸馏水定吗?

3.用的是杀死的酶液做对照,但是结果测出来和没杀死酶液的实验组相差不大!反而是没加底物蔗糖的有差距,文献上说是用杀死的酶液做对照,那没加底物蔗糖做对照行不行,那可能是什么问题???

4.有一种方法是硫酸铵盐析测酶活性的,那么这种方法结果怎么计算呢??

一直没做出来,试剂配置什么的没有问题,最近都快崩溃了 也不知道是哪出了问题,,,,劳烦高手赐教~~  不胜感激~~

大家有没有已经成熟详细的蔗糖代谢相关酶活性的测定方法,,跪求发我1025197961@qq.com
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小小小90

银虫 (初入文坛)


引用回帖:
3楼: Originally posted by dmbb at 2014-08-29 10:28:53

能不能来点实际的啊
5楼2014-08-29 10:51:07
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小小小90

银虫 (初入文坛)


引用回帖:
2楼: Originally posted by cxjzly2008 at 2014-08-29 10:24:47

来点实际的好吗?
6楼2014-08-29 10:52:09
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小小小90

银虫 (初入文坛)


跪求 高手帮忙,大家互相帮助 非诚勿扰,,大家帮忙解答一下 知道多少 告诉我多少哈~
8楼2014-08-29 11:03:41
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a8787744

新虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
转化酶直接间苯二酚法测可不可以》?
11楼2014-10-22 15:00:23
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