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脂氧合酶活性的测定的问题（葡萄） 已有1人参与
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各位大侠 我是测葡萄各组织器官的脂氧合酶 提取缓冲液用的是磷酸缓冲液（PH6.8 50mmol/L) ,其中含有1%的TritonX-100和4%PVP。 提取酶液的时候忘记预冷缓冲液了（这个关系大吗？） 反应缓冲液是醋酸缓冲液（pH5.4 100mmol/L） 反应底物亚油酸（0.5%V/V），其中加了Tween-20，并滴加了NaOH 测酶活时用的就是经典的3mL反应体系(但是我的样品有限，我就把体系缩到了1mL),由于现在是夏季，我没有预热（30℃）缓冲液和底物，在234nm处测定1分钟内的吸光值，完全没有变化，哪位大侠遇到过类似情况 请指点下 看看是哪一步出了问题 是酶液太少没反应还是很快反应完了所以没变化？？？ |
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