应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 脂氧合酶活性的测定的问题（葡萄）
51/1返回列表
查看: 1816  |  回复: 13
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
本帖产生 1 个 BioEPI ，点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

iristeng

新虫 (初入文坛)

[求助] 脂氧合酶活性的测定的问题（葡萄） 已有1人参与

各位大侠 我是测葡萄各组织器官的脂氧合酶 提取缓冲液用的是磷酸缓冲液（PH6.8 50mmol/L) ,其中含有1%的TritonX-100和4%PVP。
提取酶液的时候忘记预冷缓冲液了（这个关系大吗？）
反应缓冲液是醋酸缓冲液（pH5.4  100mmol/L）
反应底物亚油酸（0.5%V/V），其中加了Tween-20，并滴加了NaOH

测酶活时用的就是经典的3mL反应体系(但是我的样品有限，我就把体系缩到了1mL),由于现在是夏季，我没有预热（30℃）缓冲液和底物，在234nm处测定1分钟内的吸光值，完全没有变化，哪位大侠遇到过类似情况 请指点下 看看是哪一步出了问题 是酶液太少没反应还是很快反应完了所以没变化？？？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-08-29 22:22:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhouxj

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
silicare: 金币+2, 应助指数+1, 有这个可能 2012-08-31 18:20:20
最大的原因是酶没有提取出来，即使不是最佳条件也应该显示一点活性吧，要不加大酶量看看 如果还没有效果 则重新提取酶 或者购买酶来验证 祝福你i了
赞一下 回复此楼
4楼2012-08-31 12:01:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答

iristeng

新虫 (初入文坛)
自己顶一下吧~谁帮帮我啊
赞一下 回复此楼
2楼2012-08-30 21:10:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biolio2009

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
silicare: 金币+3, BioEPI+1, 应助指数+1, 经验之谈，值得借鉴 2012-08-31 18:20:02
首先测定的时候必须将缓冲液预热到测定温度，其次是你可以将反应读数时间设定的时间间隔调节为每10或者20秒读数一次，看看有没有读数变化，这样做的话再没有读数变化的话就要考虑是否有酶活或者是测定方法的适宜与否了
这是我从测定很多酶活的过程中得出的结论，希望对你及很多测定酶活遇到难题的人有帮助。
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2012-08-31 09:57:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rita_chen

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

不知道你现在做出来了没有，我也遇到这样的情况，或者有的时候出现吸光度值不断下降，你有这样的情况吗
赞一下 回复此楼
5楼2012-09-25 15:28:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 311求调剂 +4 冬十三 2026-03-18 4/200 2026-03-18 21:47 by 尽舜尧1
[考研] 一志愿天津大学化学工艺专业（081702）315分求调剂 +10 yangfz 2026-03-17 10/500 2026-03-18 20:14 by walc
[考研] 344求调剂 +6 knight344 2026-03-16 7/350 2026-03-18 20:13 by walc
[考研] 0703化学调剂 +4 pupcoco 2026-03-17 7/350 2026-03-18 12:14 by djl2006
[考研] 材料，纺织，生物（0856、0710），化学招生啦 +3 Eember. 2026-03-17 9/450 2026-03-18 10:28 by Eember.
[考研] 265求调剂 +3 梁梁校校 2026-03-17 3/150 2026-03-18 09:12 by zhukairuo
[考研] 301求调剂 +9 yy要上岸呀 2026-03-17 9/450 2026-03-18 08:58 by 无际的草原
[考研] 268求调剂 +8 一定有学上- 2026-03-14 9/450 2026-03-17 17:47 by laoshidan
[考研] 308求调剂 +4 是Lupa啊 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:12 by ruiyingmiao
[考研] 274求调剂 +5 时间点 2026-03-13 5/250 2026-03-17 07:34 by 热情沙漠
[考研] 11408 一志愿西电，277分求调剂 +3 zhouzhen654 2026-03-16 3/150 2026-03-17 07:03 by laoshidan
[考研] 318求调剂 +3 Yanyali 2026-03-15 3/150 2026-03-16 16:41 by houyaoxu
[考研] 283求调剂 +10 小楼。 2026-03-12 14/700 2026-03-16 16:08 by 13811244083
[考研] 277材料科学与工程080500求调剂 +3 自由煎饼果子 2026-03-16 3/150 2026-03-16 14:10 by 运气yunqi
[考研] 0856求调剂 +3 刘梦微 2026-03-15 3/150 2026-03-16 10:00 by houyaoxu
[考研] 求老师收留调剂 +4 jiang姜66 2026-03-14 5/250 2026-03-15 20:11 by Winj1e
[考研] 22408总分284求调剂 +3 InAspic 2026-03-13 3/150 2026-03-15 11:10 by zhq0425
[考研] 复试调剂 +3 呼呼？~+123456 2026-03-14 3/150 2026-03-14 16:53 by WTUChen
[考研] 0703化学求调剂 +7 绿豆芹菜汤 2026-03-12 7/350 2026-03-13 17:25 by njzyff
[考研] 289求调剂 +3 李政莹 2026-03-12 3/150 2026-03-13 11:02 by 求调剂zz
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭