应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 其它 » pnpg 法测定α葡萄糖苷酶的活性实验
91/1返回列表
查看: 4713  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

夏之动

银虫 (初入文坛)

[求助] pnpg 法测定α葡萄糖苷酶的活性实验 已有4人参与

我现在用pnpg法测α葡萄糖苷酶的酶活，是先用0.1M的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液溶解酶，然后取缓冲液1.6mL，酶液0.1mL，谷胱甘肽0.1mL，在49℃下水浴10min，再加入pnpg 10mM的0.2mL，49℃下水浴反应1h，再加1M碳酸钠2mL终止反应，可是测出来的吸光度只有0.1多点，我已经做了很多次了，都做不出好的结果，不知道问题出在了哪里，想问下有谁做过这方面的，指导下，谢谢！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-04-01 18:26:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xk123xk

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
PSA: 金币+2, 3u 2014-04-02 08:53:10
你的酶来源是什么，是酵母菌吗？我是用酵母菌来源的糖苷酶做的，做的时候配制出10u/ml的酶液，总反应体系是2ml的。我觉得你可以加大酶浓度或者将总反应体系变小。
赞一下(1人) 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

夏之动
2楼2014-04-01 20:36:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

夏之动

银虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by xk123xk at 2014-04-01 20:36:04
你的酶来源是什么，是酵母菌吗？我是用酵母菌来源的糖苷酶做的，做的时候配制出10u/ml的酶液，总反应体系是2ml的。我觉得你可以加大酶浓度或者将总反应体系变小。

我的酶来源是黑曲霉，这个有关系吗？酶浓度我后来有直接用厂家寄的液体酶做，是45000U/mL的，可还是没有明显显色
赞一下 回复此楼
3楼2014-04-01 21:38:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

夏之动

银虫 (初入文坛)
★
PSA: 金币+1, 3u 2014-04-02 08:53:24
引用回帖:
2楼: Originally posted by xk123xk at 2014-04-01 20:36:04
你的酶来源是什么，是酵母菌吗？我是用酵母菌来源的糖苷酶做的，做的时候配制出10u/ml的酶液，总反应体系是2ml的。我觉得你可以加大酶浓度或者将总反应体系变小。

减小总反应体系的话，分光光度计测不了呀？！
赞一下 回复此楼
4楼2014-04-01 21:40:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xk123xk

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 夏之动 at 2014-04-01 21:38:41
我的酶来源是黑曲霉，这个有关系吗？酶浓度我后来有直接用厂家寄的液体酶做，是45000U/mL的，可还是没有明显显色...

那你能不能把加入酶液的体积加大试一试，其实想提高吸光度无非就是加大酶用量，和增加反应时间。

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
5楼2014-04-02 15:48:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuzhaomin

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这个酶为什么不在生理体温37℃做反应呢？
赞一下 回复此楼
6楼2014-04-02 17:18:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

夏之动

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by xk123xk at 2014-04-02 15:48:57
那你能不能把加入酶液的体积加大试一试，其实想提高吸光度无非就是加大酶用量，和增加反应时间。
...

可以说一下你具体的方法吗？

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2014-04-02 18:12:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

懒虫红岩

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

楼主，您的底物PNPG全名是什么，PNPG有好几种，结构有α和β的，如果底物是β型的那就是底物错了
赞一下(2人) 回复此楼
8楼2015-10-28 10:18:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

娜娜小美女

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
2楼: Originally posted by xk123xk at 2014-04-01 20:36:04
你的酶来源是什么，是酵母菌吗？我是用酵母菌来源的糖苷酶做的，做的时候配制出10u/ml的酶液，总反应体系是2ml的。我觉得你可以加大酶浓度或者将总反应体系变小。

我想问一下，底物浓度大小会影响结果吗？

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
9楼2017-03-19 21:42:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 夏之动 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 5个%2F，非固定段22个字母 +7 jaasxulu 2026-07-15 8/400 2026-07-18 17:16 by Abc321
[基金申请] 面上的水很深 +10 布布和一二 2026-07-18 15/750 2026-07-18 17:07 by 6543yes
[基金申请] 国社科通讯评审 +3 潜水冠军123 2026-07-18 4/200 2026-07-18 16:29 by 最爱编纂辞典
[基金申请] 生命口C13面上会评时间 +7 luckinging 2026-07-14 11/550 2026-07-17 20:43 by 虫卜1988
[教师之家] 内心匮乏 +16 水冰月月野兔 2026-07-12 16/800 2026-07-17 19:25 by otani
[基金申请] 生命口面上会评结束了吗大家有知道结果吗？现在还没有结果正常不？ +6 碧水00 2026-07-16 9/450 2026-07-17 15:21 by jaasxulu
[论文投稿] 投英文期刊如何查重 10+5 不知道取什么名� 2026-07-15 6/300 2026-07-17 09:07 by bobvan
[基金申请] 不要再数国自然申请书的 filecode 的分隔符个数了 +14 sadpencil 2026-07-12 21/1050 2026-07-17 00:15 by wangze12014
[有机交流] 伯胺上甲基求助 100+4 002tmumu 2026-07-14 7/350 2026-07-16 19:47 by 002tmumu
[论文投稿] 跨出版社商投稿 20+5 倪好520 2026-07-13 5/250 2026-07-16 17:24 by 无视军团
[基金申请] 生生命学部会评 +4 wuke100666 2026-07-15 4/200 2026-07-16 00:12 by 啦啦小妮子
[基金申请] H口，面上，时间戳7月7日。 +3 plumage5 2026-07-15 3/150 2026-07-15 21:06 by 6543yes
[基金申请] 小木虫没落了，除了祈祷帖子，几乎看不到有价值的帖子 +13 botar 2026-07-14 14/700 2026-07-15 19:28 by 寒流32
[基金申请] 会评 +5 无名者登山 2026-07-15 5/250 2026-07-15 18:15 by 杠就是你对
[基金申请] E口会评 +11 布布和一二 2026-07-13 13/650 2026-07-15 16:34 by Kittylucky
[基金申请] E口青C会评结束了吗？ 40+3 小小书虫c 2026-07-14 9/450 2026-07-15 16:04 by 安静的知了
[论文投稿] 农业机械学报投稿周期 +3 G0DLIN 2026-07-14 7/350 2026-07-15 09:26 by xs74101122
[基金申请] 国自然面上D口祈祷 +4 monkeynana 2026-07-14 4/200 2026-07-15 09:14 by 白水煮
[基金申请] 没收到消息，再次陪跑 +3 天空星辰fly 2026-07-14 3/150 2026-07-14 19:14 by 6543yes
[基金申请] 明天E口面上会评 +8 布布和一二 2026-07-12 9/450 2026-07-13 22:59 by QTSorange
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭