应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 其它 » pnpg 法测定α葡萄糖苷酶的活性实验
91/1返回列表
查看: 4825  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

夏之动

银虫 (初入文坛)

[求助] pnpg 法测定α葡萄糖苷酶的活性实验 已有4人参与

我现在用pnpg法测α葡萄糖苷酶的酶活，是先用0.1M的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液溶解酶，然后取缓冲液1.6mL，酶液0.1mL，谷胱甘肽0.1mL，在49℃下水浴10min，再加入pnpg 10mM的0.2mL，49℃下水浴反应1h，再加1M碳酸钠2mL终止反应，可是测出来的吸光度只有0.1多点，我已经做了很多次了，都做不出好的结果，不知道问题出在了哪里，想问下有谁做过这方面的，指导下，谢谢！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-04-01 18:26:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xk123xk

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
PSA: 金币+2, 3u 2014-04-02 08:53:10
你的酶来源是什么，是酵母菌吗？我是用酵母菌来源的糖苷酶做的，做的时候配制出10u/ml的酶液，总反应体系是2ml的。我觉得你可以加大酶浓度或者将总反应体系变小。
赞一下(1人) 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

夏之动
2楼2014-04-01 20:36:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

夏之动

银虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by xk123xk at 2014-04-01 20:36:04
你的酶来源是什么，是酵母菌吗？我是用酵母菌来源的糖苷酶做的，做的时候配制出10u/ml的酶液，总反应体系是2ml的。我觉得你可以加大酶浓度或者将总反应体系变小。

我的酶来源是黑曲霉，这个有关系吗？酶浓度我后来有直接用厂家寄的液体酶做，是45000U/mL的，可还是没有明显显色
赞一下 回复此楼
3楼2014-04-01 21:38:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

夏之动

银虫 (初入文坛)
★
PSA: 金币+1, 3u 2014-04-02 08:53:24
引用回帖:
2楼: Originally posted by xk123xk at 2014-04-01 20:36:04
你的酶来源是什么，是酵母菌吗？我是用酵母菌来源的糖苷酶做的，做的时候配制出10u/ml的酶液，总反应体系是2ml的。我觉得你可以加大酶浓度或者将总反应体系变小。

减小总反应体系的话，分光光度计测不了呀？！
赞一下 回复此楼
4楼2014-04-01 21:40:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xk123xk

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 夏之动 at 2014-04-01 21:38:41
我的酶来源是黑曲霉，这个有关系吗？酶浓度我后来有直接用厂家寄的液体酶做，是45000U/mL的，可还是没有明显显色...

那你能不能把加入酶液的体积加大试一试，其实想提高吸光度无非就是加大酶用量，和增加反应时间。

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
5楼2014-04-02 15:48:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuzhaomin

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这个酶为什么不在生理体温37℃做反应呢？
赞一下 回复此楼
6楼2014-04-02 17:18:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

夏之动

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by xk123xk at 2014-04-02 15:48:57
那你能不能把加入酶液的体积加大试一试，其实想提高吸光度无非就是加大酶用量，和增加反应时间。
...

可以说一下你具体的方法吗？

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2014-04-02 18:12:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

懒虫红岩

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

楼主，您的底物PNPG全名是什么，PNPG有好几种，结构有α和β的，如果底物是β型的那就是底物错了
赞一下(2人) 回复此楼
8楼2015-10-28 10:18:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

娜娜小美女

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
2楼: Originally posted by xk123xk at 2014-04-01 20:36:04
你的酶来源是什么，是酵母菌吗？我是用酵母菌来源的糖苷酶做的，做的时候配制出10u/ml的酶液，总反应体系是2ml的。我觉得你可以加大酶浓度或者将总反应体系变小。

我想问一下，底物浓度大小会影响结果吗？

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
9楼2017-03-19 21:42:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 夏之动 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] filecode +7 cratir 2026-08-14 11/550 2026-08-15 06:19 by 学员8dgXkO
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 HFw0lei2R37i 2026-08-14 4/200 2026-08-15 04:17 by 4wMiSEwB6436
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 k0dTPqJtl0jt 2026-08-14 4/200 2026-08-15 01:28 by 4wMiSEwB6436
[基金申请] 各位道友，我要去昆明玩几天，回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 HFw0lei2R37i 2026-08-14 7/350 2026-08-15 00:40 by 4wMiSEwB6436
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 HFw0lei2R37i 2026-08-14 8/400 2026-08-15 00:16 by 4wMiSEwB6436
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果？ +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[基金申请] 奇怪，两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +8 布布和一二 2026-08-10 11/550 2026-08-14 14:58 by Equinoxhua
[硕博家园] 请教兼职经验 +3 是阿文鸭 2026-08-09 3/150 2026-08-14 12:07 by HER12025
[基金申请] FileCode能看出啥？ +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +9 majunge000 2026-08-10 12/600 2026-08-13 23:20 by iwuli
[硕博家园] 一作与独作在应聘高校教师时区别大吗 +3 mbygzh 2026-08-08 4/200 2026-08-13 19:31 by 龙-樱
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] 重要来源：本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] Filecode 又变了，巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 结合人工智能，周易传统文化，filecode打分制来了，3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 什么时候出结果，有咨询渠道？？？ +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭