24小时热门版块排行榜    

查看: 4995  |  回复: 8
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

夏之动

银虫 (初入文坛)

[求助] pnpg 法测定α葡萄糖苷酶的活性实验 已有4人参与

我现在用pnpg法测α葡萄糖苷酶的酶活,是先用0.1M的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液溶解酶,然后取缓冲液1.6mL,酶液0.1mL,谷胱甘肽0.1mL,在49℃下水浴10min,再加入pnpg 10mM的0.2mL,49℃下水浴反应1h,再加1M碳酸钠2mL终止反应,可是测出来的吸光度只有0.1多点,我已经做了很多次了,都做不出好的结果,不知道问题出在了哪里,想问下有谁做过这方面的,指导下,谢谢!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

夏之动

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by xk123xk at 2014-04-02 15:48:57
那你能不能把加入酶液的体积加大试一试,其实想提高吸光度无非就是加大酶用量,和增加反应时间。
...

可以说一下你具体的方法吗?

[ 发自小木虫客户端 ]
7楼2014-04-02 18:12:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

xk123xk

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
PSA: 金币+2, 3u 2014-04-02 08:53:10
你的酶来源是什么,是酵母菌吗?我是用酵母菌来源的糖苷酶做的,做的时候配制出10u/ml的酶液,总反应体系是2ml的。我觉得你可以加大酶浓度或者将总反应体系变小。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2014-04-01 20:36:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

夏之动

银虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by xk123xk at 2014-04-01 20:36:04
你的酶来源是什么,是酵母菌吗?我是用酵母菌来源的糖苷酶做的,做的时候配制出10u/ml的酶液,总反应体系是2ml的。我觉得你可以加大酶浓度或者将总反应体系变小。

我的酶来源是黑曲霉,这个有关系吗?酶浓度我后来有直接用厂家寄的液体酶做,是45000U/mL的,可还是没有明显显色
3楼2014-04-01 21:38:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

夏之动

银虫 (初入文坛)

★
PSA: 金币+1, 3u 2014-04-02 08:53:24
引用回帖:
2楼: Originally posted by xk123xk at 2014-04-01 20:36:04
你的酶来源是什么,是酵母菌吗?我是用酵母菌来源的糖苷酶做的,做的时候配制出10u/ml的酶液,总反应体系是2ml的。我觉得你可以加大酶浓度或者将总反应体系变小。

减小总反应体系的话,分光光度计测不了呀?!
4楼2014-04-01 21:40:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 9/450 2026-10-11 22:34 by XQNyDCa1Tk5n
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 8/400 2026-10-11 22:26 by XQNyDCa1Tk5n
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 10/500 2026-10-11 22:26 by XQNyDCa1Tk5n
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 9/450 2026-10-11 22:15 by XQNyDCa1Tk5n
[考博] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 22:11 by XQNyDCa1Tk5n
[基金申请] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 9/450 2026-10-11 22:06 by XQNyDCa1Tk5n
[教师之家] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 (EPI+-1)(金币-50) +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 10/500 2026-10-11 22:06 by XQNyDCa1Tk5n
[有机交流] OpenAI又攻克数学难题了,离AI做有机合成还有多远? +3 wangyl_123 2026-10-10 6/300 2026-10-11 15:04 by Abin0406
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 (EPI+-1)(金币-50) +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 10/500 2026-10-11 14:25 by VOMexwnDzOFZ
[教师之家] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 (EPI+-1)(金币-50) +4 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 14:05 by VOMexwnDzOFZ
[考研] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 8/400 2026-10-11 13:51 by VOMexwnDzOFZ
[硕博家园] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 8/400 2026-10-11 13:45 by VOMexwnDzOFZ
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 10:54 by VOMexwnDzOFZ
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 10:34 by VOMexwnDzOFZ
[考博] 招收博士生一名 +3 mandolin 2026-10-10 3/150 2026-10-11 10:21 by 不是山谷!
[教师之家] 课题组会帮你通过考核么? +3 好运来~9527 2026-10-10 5/250 2026-10-11 09:00 by 好运来~9527
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 4/200 2026-10-11 03:14 by M0zrYVSAnxpE
[有机交流] 各位大佬,路线设计求助 +6 zapen 2026-10-08 8/400 2026-10-10 15:59 by zapen
[基金申请] 入职后第一次管课题组的专利缴费,对账才发现官费比别人多掏了一倍 +5 13108017953 2026-10-08 5/250 2026-10-10 11:15 by wdwd123
[有机交流] 我应该选哪条合成路线让实验成功率高一些? +5 jing816y 2026-10-08 9/450 2026-10-10 09:05 by zapen
信息提示
请填处理意见