应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 其它 » pnpg 法测定α葡萄糖苷酶的活性实验
91/1返回列表
查看: 4865  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

夏之动

银虫 (初入文坛)

[求助] pnpg 法测定α葡萄糖苷酶的活性实验 已有4人参与

我现在用pnpg法测α葡萄糖苷酶的酶活，是先用0.1M的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液溶解酶，然后取缓冲液1.6mL，酶液0.1mL，谷胱甘肽0.1mL，在49℃下水浴10min，再加入pnpg 10mM的0.2mL，49℃下水浴反应1h，再加1M碳酸钠2mL终止反应，可是测出来的吸光度只有0.1多点，我已经做了很多次了，都做不出好的结果，不知道问题出在了哪里，想问下有谁做过这方面的，指导下，谢谢！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-04-01 18:26:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xk123xk

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
PSA: 金币+2, 3u 2014-04-02 08:53:10
你的酶来源是什么，是酵母菌吗？我是用酵母菌来源的糖苷酶做的，做的时候配制出10u/ml的酶液，总反应体系是2ml的。我觉得你可以加大酶浓度或者将总反应体系变小。
赞一下(1人) 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

夏之动
2楼2014-04-01 20:36:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

夏之动

银虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by xk123xk at 2014-04-01 20:36:04
你的酶来源是什么，是酵母菌吗？我是用酵母菌来源的糖苷酶做的，做的时候配制出10u/ml的酶液，总反应体系是2ml的。我觉得你可以加大酶浓度或者将总反应体系变小。

我的酶来源是黑曲霉，这个有关系吗？酶浓度我后来有直接用厂家寄的液体酶做，是45000U/mL的，可还是没有明显显色
赞一下 回复此楼
3楼2014-04-01 21:38:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

夏之动

银虫 (初入文坛)
★
PSA: 金币+1, 3u 2014-04-02 08:53:24
引用回帖:
2楼: Originally posted by xk123xk at 2014-04-01 20:36:04
你的酶来源是什么，是酵母菌吗？我是用酵母菌来源的糖苷酶做的，做的时候配制出10u/ml的酶液，总反应体系是2ml的。我觉得你可以加大酶浓度或者将总反应体系变小。

减小总反应体系的话，分光光度计测不了呀？！
赞一下 回复此楼
4楼2014-04-01 21:40:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xk123xk

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 夏之动 at 2014-04-01 21:38:41
我的酶来源是黑曲霉，这个有关系吗？酶浓度我后来有直接用厂家寄的液体酶做，是45000U/mL的，可还是没有明显显色...

那你能不能把加入酶液的体积加大试一试，其实想提高吸光度无非就是加大酶用量，和增加反应时间。

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
5楼2014-04-02 15:48:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuzhaomin

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这个酶为什么不在生理体温37℃做反应呢？
赞一下 回复此楼
6楼2014-04-02 17:18:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

夏之动

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by xk123xk at 2014-04-02 15:48:57
那你能不能把加入酶液的体积加大试一试，其实想提高吸光度无非就是加大酶用量，和增加反应时间。
...

可以说一下你具体的方法吗？

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2014-04-02 18:12:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

懒虫红岩

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

楼主，您的底物PNPG全名是什么，PNPG有好几种，结构有α和β的，如果底物是β型的那就是底物错了
赞一下(2人) 回复此楼
8楼2015-10-28 10:18:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

娜娜小美女

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
2楼: Originally posted by xk123xk at 2014-04-01 20:36:04
你的酶来源是什么，是酵母菌吗？我是用酵母菌来源的糖苷酶做的，做的时候配制出10u/ml的酶液，总反应体系是2ml的。我觉得你可以加大酶浓度或者将总反应体系变小。

我想问一下，底物浓度大小会影响结果吗？

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
9楼2017-03-19 21:42:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 夏之动 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的？ +16 爱看书的可乐 2026-08-26 18/900 2026-08-29 07:32 by winsaint
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 5/250 2026-08-29 06:40 by gy1nBQXYQJqL
[博后之家] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 4/200 2026-08-29 05:45 by gy1nBQXYQJqL
[基金申请] 国自然评审意见 +11 wangmingqi 2026-08-28 15/750 2026-08-29 00:17 by fangyl2005
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高，自己申请怎么就这么难 +12 Kittylucky 2026-08-27 13/650 2026-08-29 00:04 by superceng
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +13 晴天加油 2026-08-26 14/700 2026-08-28 18:36 by huagongfeihu
[教师之家] 导师吐槽：我怎么摊上了这么个极品研究生！ +8 苏东坡二世 2026-08-23 8/400 2026-08-28 14:41 by lkforward
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 哪位高人中了，把查询到的截图贴出来让我看看，让我长长见识 +5 yuleib84 2026-08-26 6/300 2026-08-28 00:02 by yudaoqian88
[基金申请] 面上合作单位盖章 +5 ssyjh 2026-08-27 5/250 2026-08-27 20:50 by gdfollow
[基金申请] 看板上这么多中的，有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 我不理解！ +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +7 process2012 2026-08-23 10/500 2026-08-26 19:23 by hmhminy
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件，有关系吗？ +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候，我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
[基金申请] 某些机构，以效率低为荣，以效率低作为存在感 +9 yuleib84 2026-08-25 10/500 2026-08-25 17:14 by alexon
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭