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阳光金鱼唐

金虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】PCR扩增核心片段,再也扩不出来了,怎么办 已有11人参与

自己设计引物做PCR扩增一核心片段,以前扩出来过,并且很特异,带很亮,回收了,转化没成功,重新扩,再也扩不出来了,怎么办?现在所有的试剂、反应条件都跟以前一摸一样,PCR后跑电泳却只有很长的拖带,请问是怎么回事?如何才能重新把那条带扩出来?
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microsome

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
还是上次合成的引物吗   如果是   夏季的温度变化有影响  选个凉快的天气试试
10楼2010-06-15 21:14:46
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xpb2005

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
模板是以前的还是重提的?
2楼2010-06-12 20:39:59
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lixg

铁杆木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
估计是模板降解了,重新制备下模板试试。另外,PCR的时候作平行的两管。
3楼2010-06-13 08:21:08
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阳光金鱼唐

金虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by xpb2005 at 2010-06-12 20:39:59:
模板是以前的还是重提的?

模板没问题,扩b-actin扩的很好
不知道什么是生活了,也不知道生活是什么了
4楼2010-06-13 11:26:48
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