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Angela-Fish

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】双酶切质粒后,目的条带浅且前方有模糊亮带已有10人参与

今天做了个双酶切,用EcoR 1和HindIII对质粒进行双酶切,本来在紫外灯下应该是两条清晰的亮带,且短的是我的目的条带,但是电泳之后却是如下的:

宽条带底部的那条不是很清晰的条带是我的目的条带,请问泳道最前方的模糊的条带是什么东西呢,谢谢!
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Angela-Fish

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by 香菱儿 at 2010-05-12 23:29:24:
切的是质粒吗?
如果切的是质粒,质粒是如何提取的?RNAse何时加的?

是质粒啊,是师哥提供的质粒,该质粒已经确定是连接了目的片段的载体质粒,我现在就是要把这个目的片段切下来。RNAase我不太清楚加了没有,不过我觉得应该不是这个问题吧。和这个一批做的另外一个连接有相似片段的同样的载体质粒,同样双酶切后就出现了清晰的两条带。我不知道是不是质粒存放过程中受到了核酶的污染啊。这些质粒都是在EP管里存放于-20度里的。
神啊,这是为什么呢~~
6楼2010-05-13 00:12:01
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pidou213

木虫 (正式写手)

是不是没有切完的基因呢??或者说没有切下来
见得多爱的多
2楼2010-05-12 23:21:05
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香菱儿

铁杆木虫 (著名写手)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
reasonspare(金币+2):谢谢分享。 2010-05-13 06:43:03
切的是质粒吗?
如果切的是质粒,质粒是如何提取的?RNAse何时加的?
漫洒英雄泪,相离处士家。谢慈悲剃度在莲台下。没缘法转眼分离乍。赤条条来去无牵挂。那里讨烟蓑雨笠卷单行?一任俺芒鞋破钵随缘化!
3楼2010-05-12 23:29:24
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tmvb

新虫 (初入文坛)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
reasonspare(金币+1):谢谢分享。 2010-05-13 06:42:44
是不是你的酶切专属性不强啊,切出了多个片段
4楼2010-05-12 23:35:39
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