24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1465  |  回复: 12

hongchenlyan

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】为什么测序之后各个菌落之间总会有碱基的差异? 已有8人参与

设计引物从基因组DNA中扩增了一个序列,转化到大肠杆菌中,挑取多个菌落测序,为什么各个菌落之间总会有几个碱基的差异??PCR扩增使用的高保真酶。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

度百

铁杆木虫 (正式写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
scelab(金币+1):正解 2010-04-26 17:23
高保真酶也不是100%不出现失误,高保真酶也只是相对而言。只是出现失误的概率比较小而已。
我在故我思!
2楼2010-04-26 14:54:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lihaoexe

银虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
1949stone(金币+1): 2010-04-27 07:51
可能是测序的问题,测序开始的部分片段是不准确的
3楼2010-04-26 15:05:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hongchenlyan

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by lihaoexe at 2010-04-26 15:05:57:
可能是测序的问题,测序开始的部分片段是不准确的

这一问题应该通过去除载体序列而消除了,测序引物与片段插入位点会有几十个碱基。而且我的序列是1000bp左右,中间也会有碱基的差异。
4楼2010-04-26 15:40:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hongchenlyan

金虫 (小有名气)

★ ★
scelab(金币+2):欢迎上图~~~ 2010-04-26 17:23
再加一部分序列比对图片,而且有些差异是一个序列与其余三个序列不同。



5楼2010-04-26 15:51:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

duanyongzhong

银虫 (正式写手)


1949stone(金币+1): 2010-04-27 07:51
有差异才对呀没差异就有问题了
6楼2010-04-26 19:24:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

段家一凡

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by duanyongzhong at 2010-04-26 19:24:17:
有差异才对呀没差异就有问题了

还是误导,同一个基因怎么会有差异。应该是PCR过程的出错,换一种pfu酶试一下。
7楼2010-04-27 01:32:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hongchenlyan

金虫 (小有名气)

顶起。求原因?
8楼2010-04-27 08:51:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dfl204

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
也要看你的模板是什么了

如果以gDNA或者cDNA lib为模板,可能会有SNP出现的可能
9楼2010-04-27 09:07:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小周

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
拿胶图好好比较一下吧,测序有时候也不完全正确
10楼2010-04-27 09:09:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 hongchenlyan 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0703化学321分求调剂 +7 三dd. 2026-03-30 8/400 2026-03-30 17:03 by tianyyysss
[考研] 材料科学与工程调剂 +8 深V宿舍吧 2026-03-30 8/400 2026-03-30 16:19 by 晶体之美
[考研] 288资源与环境专硕求调剂,不限专业,有学上就行 +5 lllllos 2026-03-30 5/250 2026-03-30 15:05 by cq2548
[考研] 296求调剂 +10 彼岸t 2026-03-29 10/500 2026-03-30 10:50 by 探123
[考研] 085600 286分 材料求调剂 +10 麻辣鱿鱼 2026-03-27 11/550 2026-03-29 21:52 by nanaliuyun
[考博] 26申博自荐 +6 whh869393 2026-03-24 6/300 2026-03-29 21:05 by nxgogo
[考研] 294分080500材料科学与工程求调剂 +8 柳溪边 2026-03-26 8/400 2026-03-29 20:42 by 唐沐儿
[考研] 0856求调剂 +13 zhn03 2026-03-25 14/700 2026-03-29 08:13 by fmesaito
[考研] 生物学学硕,一志愿湖南大学,初试成绩338 +6 YYYYYNNNNN 2026-03-26 7/350 2026-03-28 20:52 by 唐沐儿
[考研] 071000生物学求调剂,初试成绩343 +7 小小甜面团 2026-03-25 7/350 2026-03-28 20:25 by 唐沐儿
[考研] 压国家一区线,求导师收留,有恩必谢! +7 迷人的哈哈 2026-03-28 7/350 2026-03-28 16:47 by 催化大白
[考研] 本科新能源科学与工程,一志愿华理能动285求调剂 +3 AZMK 2026-03-27 5/250 2026-03-28 16:19 by xxxsssccc
[考研] 283求调剂 +3 A child 2026-03-28 3/150 2026-03-28 15:41 by ms629
[考研] 317求调剂 +6 十闲wx 2026-03-24 6/300 2026-03-28 13:27 by Iveryant
[考研] 330一志愿中国海洋大学 化学工程 085602 有读博意愿 求调剂 +3 wywy.. 2026-03-27 4/200 2026-03-28 03:32 by fmesaito
[考研] 复试调剂,一志愿南农083200食品科学与工程 +5 XQTJZ 2026-03-26 5/250 2026-03-27 14:49 by 狂炫麦当当
[考研] 调剂 +3 李嘉图·S·路 2026-03-27 3/150 2026-03-27 11:19 by wangjy2002
[考研] 一志愿天津大学339材料与化工求调剂 +3 江往卖鱼 2026-03-26 3/150 2026-03-26 09:42 by 王小欠i
[考研] 机械学硕总分317求调剂!!!! +4 Acaciad 2026-03-25 4/200 2026-03-25 19:59 by hanserlol
[考研] 085404电子信息284分求调剂 +4 13659058978 2026-03-24 4/200 2026-03-24 12:15 by syl20081243
信息提示
请填处理意见