| 查看: 2504 | 回复: 15 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
听雪看山木虫 (职业作家)
西游家族之T所长
|
[交流]
【求助/交流】单酶切载体竟然没切开，寻求原因？？ 已有5人参与
|
||
|
我用的载体是5500bp，酶是XmaI，去过磷酸化的。这个酶切已经做过n多次了，插入基因就是没办法和载体连接上，自连现象严重。当时以为是去磷酸化步骤的问题，然后就做过2次去磷酸化。 后来在做完酶切后做了一个转化，将50ng酶切液用电子穿孔仪转入感受态细胞，隔夜培养后发现n多菌斑，那就是意味着没有酶切成功，心里这个郁闷啊！ 我用的这个酶据说是比较难反应的，所以当时酶切都是隔夜至少10个小时以上了！！ 我现在真的是一点办法也没有了，本来就是新手，第一次做，竟然还碰到这么大的问题，3个月了，一点进展都没有，着急啊！ 恳请高手们给点建议，小虾米在这多谢了！！ |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有280人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
-
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
湖北师范大学招调剂啦
已经有3人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 载体单酶切后去磷酸化还会自连吗？
已经有5人回复
- 关于xba I单酶切后的TA连接
已经有7人回复
- 表达载体双酶切
已经有9人回复
- Eco88l单酶切pUC18，失败原因及解决办法？？？？
已经有4人回复
- 载体酶切
已经有13人回复
- 质粒单酶切出现两条带
已经有18人回复
- 【求助/交流】大家酶切载体的时候回收完了用不用碱性磷酸酶处理啊？
已经有6人回复
- 【求助/交流】xho1单酶切，总连不上(片段3K,载体5K)
已经有8人回复
- 【求助/交流】片段转进去，提质粒酶切发现载体小了，想不明白
已经有19人回复
- 【求助/交流】质粒单酶切后竟然两条带
已经有32人回复
- 【求助/交流】大家酶切载体怎么切？一般切多久？
已经有6人回复
- 【分享】关于载体双酶切的一些经验
已经有19人回复
- 【求助/交流】关于克隆连接
已经有15人回复
- 【求助/交流】单酶切连接的克隆急……
已经有10人回复
听雪看山
木虫 (职业作家)
西游家族之T所长
- 应助: 3 (幼儿园)
- 贵宾: 1.037
- 金币: 2112.6
- 散金: 3557
- 红花: 43
- 沙发: 3
- 帖子: 3644
- 在线: 445.1小时
- 虫号: 509830
- 注册: 2008-02-23
- 性别: MM
- 专业: 植物营养学
3楼2010-02-08 22:25:47
gyesang
荣誉版主 (著名写手)
-
专家经验: +24 - MolEPI: 31
- 应助: 599 (博士)
- 贵宾: 2.689
- 金币: 24334.9
- 散金: 1088
- 红花: 88
- 沙发: 2
- 帖子: 2327
- 在线: 623.1小时
- 虫号: 849017
- 注册: 2009-09-16
- 性别: GG
- 专业: 细胞信号转导
- 管辖: 分子生物
2楼2010-02-08 22:04:25
4楼2010-02-09 01:22:17
yang0071
木虫 (职业作家)
- 应助: 207 (大学生)
- 金币: 1573.4
- 散金: 9319
- 红花: 21
- 帖子: 4041
- 在线: 647.7小时
- 虫号: 50941
- 注册: 2004-07-15
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
5楼2010-02-09 10:51:07
