24小时热门版块排行榜    

查看: 2534  |  回复: 10
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

Apfel

新虫 (小有名气)

[交流] 蛋白诱导 已有2人参与

我的目的基因的大小事1200多,克隆载体测序,表达载体测序都没有问题,可是用IPTG诱导的时候就是没有目的条带出来,我的载体是PET-21,诱导的条件是:37°C,IPTG浓度是1mM,做了好多次了,就是没有目的条带的出现。很着急,希望大家能给分析一下,感激涕零,不胜切切。

[ Last edited by Apfel on 2009-8-26 at 21:36 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Apfel

新虫 (小有名气)

另外30°C的诱导我也试过了,也没有诱导出来。很郁闷啊。
8楼2009-08-26 23:50:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
难道全部是包涵体形式存在的?
这样试试看,我一般是这么诱导的:
37度摇到 OD600=0.6。然后加入0.1mM 和1.0mM ,同时摇两瓶,这时候的温度换成25-30度之间的某个都可以。还没有跑SDS-PAGE没有出来条带的时候呢。

祝好运
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
2楼2009-08-26 22:20:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

忘记将来

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
一般这个条件诱导不出来,就要考虑换载体了
3楼2009-08-26 22:26:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Apfel

新虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by Apfel at 2009-8-26 21:31:
我的目的基因的大小事1200多,克隆载体测序,表达载体测序都没有问题,可是用IPTG诱导的时候就是没有目的条带出来,我的载体是PET-21,诱导的条件是:37°C,IPTG浓度是1mM,做了好多次了,就是没有目的条带的出现 ...

我试一下吧,谢谢。
4楼2009-08-26 23:04:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 快农历七夕节了,轻松一下,男人悄悄话,女施主请不要进来。 +3 Tide man 2026-08-14 3/150 2026-08-16 17:47 by jurkat.1640
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +11 家与远方 2026-08-10 16/800 2026-08-16 10:28 by ray43
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +10 majunge000 2026-08-11 12/600 2026-08-16 08:18 by xli1984
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +6 wangze12014 2026-08-14 7/350 2026-08-15 20:12 by gltch
[基金申请] filecode +8 cratir 2026-08-14 12/600 2026-08-15 18:08 by zyfgau
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +10 majunge000 2026-08-10 13/650 2026-08-15 12:26 by hanpeng972
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +8 布布和一二 2026-08-10 11/550 2026-08-14 14:58 by Equinoxhua
[硕博家园] 请教兼职经验 +3 是阿文鸭 2026-08-09 3/150 2026-08-14 12:07 by HER12025
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
信息提示
请填处理意见