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xbburton

至尊木虫 (小有名气)

应助: 1 (幼儿园)
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在线: 142.7小时
虫号: 140982
注册: 2005-12-20
性别: GG
专业: 疫苗学

[交流] 谁做过双链RNA的RT-PCR已有1人参与

最近在做双链RNA的RT-PCR，此双链RNA比较特殊，不含polyA序列，因此本人采用目标引物直接进行RT反应，可是最终扩出来的电泳带却呈弥散的一片，请帮我分析一下这是什么原因，我该如何继续实验？按道理讲，这时所扩增出来的这些弥散带都应该是两端含有我所设计引物的DNA片段，由于我设计的上下游引物分别加了起始和终止密码，那么我能否将这种弥散的DNA构建入表达载体中，让他们表达，从而希望获得各种不同氨基酸序列的多肽？

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【求助/交流】qRT-PCR需要做不加RT的对照吗？已经有3人回复

1楼2009-03-15 07:00:54

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sutao1979

木虫 (著名写手)

小木虫10年groupleader

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专业: 植物分类学

mRNArt之后的cDNA做agarose gel的时候就是弥散的，正常；你应当再pcr一下rt之后的cDNA看看，这时应当有带

会当凌绝顶，一览众山小

2楼2009-03-15 16:56:10

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