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上官譞

新虫 (初入文坛)

[求助] 有做过RNA干涉的高手吗?

我有很多RNA干涉的问题想请教。。。有做过的有时间回复一下,谢谢
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yqlmshui

禁虫 (小有名气)

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2楼2011-08-15 09:44:00
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上官譞

新虫 (初入文坛)

我是要用GATEWAY构建载体,载体上要插入目的基因的反向互补序列,我不明白反向互补序列是什么意思,怎么设计引物扩增呢?
3楼2011-08-15 10:35:23
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w2boluo

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

上官譞(金币+2): 谢谢 2011-08-15 14:36:09
请先阅读invitrogen关于gateway的说明。引物如何设计里面说的很明白了。
How about the future?
4楼2011-08-15 11:05:56
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上官譞

新虫 (初入文坛)

我还想问一下,选取干涉片段时,保守区域如何选定,比对的时候有什么要注意的吗?刚开始实验,比较晕,谢谢!
5楼2011-08-15 15:24:18
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w2boluo

金虫 (小有名气)

★ ★ ★
lstt09nk(金币+3): 感谢参与 2011-08-15 22:21:44
保守和非保守只是相对的概念,由基因组中基因家族相关蛋白区段的同源性决定,如果你这个家族的同源性都很高,多数区段都是8,90%的同源性,那么50%左右的区域就可以算非保守,但对多数蛋白家族而言,50%已经算高度同源。
对于gateway方法的rnai设计而言,不必太执着这个概念,先有rnai群体,再考虑特异性,不然还没做就要纠结太多了。:)
How about the future?
6楼2011-08-15 21:38:23
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上官譞

新虫 (初入文坛)

非常感谢!
7楼2011-08-16 09:06:05
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