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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » pcr条带弥散，求助
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新虫 (初入文坛)

[交流] pcr条带弥散，求助 已有6人参与

有些产物电泳条带弥散，用的500的marker，用的生工pcr试剂盒，体系50ul，上下游各2ul，模版浓度50ng\ul，加了2微升，buffer10ul，dntp5ul，镁离子浓度4，taq酶0.5ul，加水补足.都是用的这个体系，右边做了梯度测试50-60度，左边是用比较亮的温度p的，但是条带弥散，pcr设定为94度5分钟，然后94度1分钟，57.5一分钟，72两分钟，35循环，最后72十分钟，求大家看看有什么问题，求批评指正

pcr条带弥散，求助


pcr条带弥散，求助-1


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1楼 2017-10-07 17:53:28
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13937923754

新虫 (初入文坛)
自己顶～

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2楼2017-10-07 17:59:04
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新虫 (初入文坛)
pcr条带弥散，求助-3

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3楼2017-10-07 22:07:31
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13937923754

新虫 (初入文坛)
又跑了一次，成了这样

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4楼2017-10-07 22:07:55
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eagle00768

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
减少模版量再试试？

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5楼2017-10-08 06:33:40
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hanxiaominhu

至尊木虫 (著名写手)
减少循环数试试。

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6楼2017-10-08 07:10:11
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635270fmaifx

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
升高退火温度0.5-1度左右，加大循环次数，我们实验室用的是prime mix.这个试剂包括了你使用的各种酶类及镁离子，希望对你有用

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7楼2017-10-09 14:06:04
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小小竹叶

新虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你的问题解决了吗，我也碰到这样的问题

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8楼2018-04-10 17:29:14
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xyz_su

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你好，你还有这个说明书的图片吗？可以分享给我吗？我也是跑电泳遇到了同样的问题，谢谢
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9楼2018-04-13 13:14:34
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赤脚女孩

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
请问你的问题解决了吗？我目前正遇到这样的问题

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10楼2018-05-29 17:39:15
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