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新虫 (初入文坛)

[交流] pcr条带弥散,求助 已有6人参与

有些产物电泳条带弥散,用的500的marker,用的生工pcr试剂盒,体系50ul,上下游各2ul,模版浓度50ng\ul,加了2微升,buffer10ul,dntp5ul,镁离子浓度4,taq酶0.5ul,加水补足.都是用的这个体系,右边做了梯度测试50-60度,左边是用比较亮的温度p的,但是条带弥散,pcr设定为94度5分钟,然后94度1分钟,57.5一分钟,72两分钟,35循环,最后72十分钟,求大家看看有什么问题,求批评指正

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新虫 (初入文坛)

2楼2017-10-07 17:59:04
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新虫 (初入文坛)

3楼2017-10-07 22:07:31
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新虫 (初入文坛)

4楼2017-10-07 22:07:55
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eagle00768

木虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
减少模版量再试试?

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5楼2017-10-08 06:33:40
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hanxiaominhu

至尊木虫 (著名写手)

6楼2017-10-08 07:10:11
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635270fmaifx

铜虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
升高退火温度0.5-1度左右,加大循环次数,我们实验室用的是prime mix.这个试剂包括了你使用的各种酶类及镁离子,希望对你有用

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7楼2017-10-09 14:06:04
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小小竹叶

新虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你的问题解决了吗,我也碰到这样的问题

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8楼2018-04-10 17:29:14
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xyz_su

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你好,你还有这个说明书的图片吗?可以分享给我吗?我也是跑电泳遇到了同样的问题,谢谢
9楼2018-04-13 13:14:34
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赤脚女孩

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
请问你的问题解决了吗?我目前正遇到这样的问题

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10楼2018-05-29 17:39:15
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