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十字幻影

木虫 (正式写手)

小小龙

[求助] PCR非特异性扩增 已有1人参与

如图,4,8泳道为对照,跑的很好,没有非特异性扩增。但为何其他泳道都有多条非特异性扩增?如果是退火温度不合适,不应该全部都是非特异性扩增吗?请大神指教~

PCR非特异性扩增


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sherlock0088

金虫 (小有名气)

2楼2017-06-09 08:07:19
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sherlock0088

金虫 (小有名气)

对照用模板是啥,非对照又用的啥模板

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3楼2017-06-09 08:08:48
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小苹果168

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
内容已删除
4楼2017-06-09 13:31:32
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makira

铜虫 (初入文坛)

像楼主所说,4号、8号泳道为对照,跑的很好,没有非特异性扩增。尤其是5-7号泳道出现非特异扩增。猜想原因如下:是因为对照DNA的浓度较高,PCR体系比较适合于对照DNA的扩增;但其余泳道由于DNA浓度低,在同样的反应体系下,相对来看,剩余的组分就易产生非特异扩增。建议先适当稀释对照DNA的浓度,再对PCR体系进行摸索。
5楼2019-08-17 00:55:34
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