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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR非特异性扩增
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十字幻影

木虫 (正式写手)

小小龙

[求助] PCR非特异性扩增 已有1人参与

如图，4，8泳道为对照，跑的很好，没有非特异性扩增。但为何其他泳道都有多条非特异性扩增？如果是退火温度不合适，不应该全部都是非特异性扩增吗？请大神指教～

PCR非特异性扩增


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脚踏实地，仰望星空
1楼 2017-06-08 22:40:21
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sherlock0088

金虫 (小有名气)
同一对引物？

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2楼2017-06-09 08:07:19
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sherlock0088

金虫 (小有名气)
对照用模板是啥，非对照又用的啥模板

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3楼2017-06-09 08:08:48
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小苹果168

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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4楼2017-06-09 13:31:32
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makira

铜虫 (初入文坛)
像楼主所说，4号、8号泳道为对照，跑的很好，没有非特异性扩增。尤其是5-7号泳道出现非特异扩增。猜想原因如下：是因为对照DNA的浓度较高，PCR体系比较适合于对照DNA的扩增；但其余泳道由于DNA浓度低，在同样的反应体系下，相对来看，剩余的组分就易产生非特异扩增。建议先适当稀释对照DNA的浓度，再对PCR体系进行摸索。
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5楼2019-08-17 00:55:34
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