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1楼2017-03-17 15:36:09

都从新来过

新虫 (初入文坛)

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28a是低拷贝首先说下体系载体1.5 基因6 10??buffer 1 水0.5 酶0.5 16度水浴4到6hr

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6楼2017-03-18 00:09:03

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十四_14

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连接时比较关键的是载体和目的片段的比例连接酶的话0.5微升就可以
所以我觉得连不上应该不是连接酶的问题

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雪糕哦

2楼2017-03-17 15:41:16

雪糕哦

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2楼: Originally posted by 十四_14 at 2017-03-17 15:41:16
连接时比较关键的是载体和目的片段的比例连接酶的话0.5微升就可以
所以我觉得连不上应该不是连接酶的问题

感谢回答。之前做得载体和基因比例都是1：6，今天再做一次1：3的，看看能不能连上。

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3楼2017-03-17 15:50:48

jcstone1027

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我们最近也在做连接，我们的体系是25微升，我觉得载体根据浓度还是尽量少加点，我们也一直连接效率非常低，阳性克隆非常少，你需要验证下是不是连接酶是不是有问题。

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4楼2017-03-17 22:39:21