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wuhao4850103银虫 (著名写手)
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荧光定量PCR扩增后溶解曲线出现杂峰
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| 本人最近在做荧光定量PCR实验，用的引物和以前的一样，只是cDNA模板不同，但是最近实验时发现扩增后的溶解曲线出现了或大或小的杂峰，以前用这些引物扩增的时候溶解曲线里面基本上没有杂峰。所以，我想会不会是由于每次做实验的时候都要把稀释后的引物从负20度拿出来，然后融化一部分，结果引物反复冻融以后造成了这种现象，引物反复冻融会影响其扩增的特异性吗？ |
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wuhao4850103: 金币+5 2016-11-29 20:11:43
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2楼2016-11-28 21:52:03
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CT值多大？如果样品浓度太少的话会出现菲特异性扩增 发自小木虫Android客户端 |
3楼2016-11-29 00:01:04
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wuhao4850103: 金币+5 2016-12-01 23:16:11
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wuhao4850103: 金币+5 2016-12-01 23:16:11
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ct值去到35,肯定就是这个模版的这个基因浓度太低了，模版浓度高一般不会出现这种问题 发自小木虫Android客户端 |
10楼2016-12-01 18:39:18