荧光定量PCR,用的TAKARA的SYBGREEN体系,相对定量,浓度梯度为6次方到0次方.在实验结果中,6-3次方的质粒的溶解曲线中间隔很均匀,但是到了后面就什么也没有了,就和NTC一样....我的SLOPE=-5.07
还有请问,是不是把质粒作到最低浓度,得出的标准曲线的斜率可能会向-3.2靠近呢?比如说从10到0次方的浓度梯度,只做10到5次方质粒的斜率和做5到0次方的斜率会差很远吗?
我觉得这两条线的斜率应该是一样的才对,但是为什么实验室师姐做出来的会差异很大呢?而且她建议我每次定量都尽量做到最低的质粒浓度.
[ Last edited by 西瓜 on 2012-5-26 at 10:19 ] |
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