4楼: Originally posted by 闲来小译 at 2016-08-09 08:04:52
原始质粒挺脏的，怎么得到的？如果是1.5kb，质粒也太小了，还会有抗性基因的表达？确定你用的抗生素是有效的。如果已知8kb上特定序列信息，可以用菌落PCR筛选正确的8kb质粒。
PS：胶图上的三号孔是什么鬼？

3楼: Originally posted by 781055707 at 2016-08-09 08:02:53
（然后小提质粒后跑胶最亮还是1.5kb，拿去测序完全不对。）这什么质粒，测序结果发来看看。这种多次突变的话楼主应该选PUC的拷贝型质粒呀，构建完后在转目的质粒。实验要一步一步来的，贪多嚼不烂。

4楼: Originally posted by 闲来小译 at 2016-08-09 08:04:52
原始质粒挺脏的，怎么得到的？如果是1.5kb，质粒也太小了，还会有抗性基因的表达？确定你用的抗生素是有效的。如果已知8kb上特定序列信息，可以用菌落PCR筛选正确的8kb质粒。
PS：胶图上的三号孔是什么鬼？

8楼: Originally posted by jie123400 at 2016-08-09 14:44:23
你这是质粒污染？把原始质粒做单酶切，回收条带再连接看是否能得到正确质粒。