应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 8kb的质粒转化小提质粒后跑胶只有1.5kb条带最亮
192/2返回列表上一页12
查看: 2988  |  回复: 18
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

象牙白

银虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 少文329 at 2016-08-09 19:14:42
质粒的大小本来用线性maker就看不出来，不知道楼主用的什么maker

用的是线性的marker，做个酶切看看。
赞一下 回复此楼
小元，加油！
11楼2016-08-09 20:44:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

vanchy

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
质粒多的话建议把质粒纯化一下再转化
赞一下(1人) 回复此楼
12楼2016-08-10 16:45:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

976592787

木虫 (正式写手)

国家自然科学基金委员会委员长
原始质粒你转化了跑胶就这样的结果很正常，你去追究这个问题干嘛，搞笑，质粒是环状的dna分子，直接跑胶的话是没法用marker来对应分子量的，你要切了之后才行，而且切了之后最理想情况是全切开，就在8kb左右，如果没有全切开就至少三条带，环状dna，线状dna，二聚化质粒等等

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
耻与众草之为伍，何亭亭而独芳！何不为人之所赏兮，深山穷谷委严霜。
13楼2016-08-10 22:18:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

象牙白

银虫 (小有名气)
引用回帖:
13楼: Originally posted by 976592787 at 2016-08-10 22:18:54
原始质粒你转化了跑胶就这样的结果很正常，你去追究这个问题干嘛，搞笑，质粒是环状的dna分子，直接跑胶的话是没法用marker来对应分子量的，你要切了之后才行，而且切了之后最理想情况是全切开，就在8kb左右，如果没 ...

我转化完测序结果不对，当我想要扩增质粒的时候很尴尬。
赞一下 回复此楼
小元，加油！
14楼2016-08-11 14:17:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

korchagin

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

质粒只能通过单酶切后跑电泳才能确定大小；另外优化一下你的提取方法，说不定这里边有些问题
赞一下 回复此楼
15楼2016-08-12 09:57:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

MMCCBB

新虫 (著名写手)
简单的办法切胶回收8000条带的质粒，测序它可以做模板，然后开始定点突变。最后做转化。你可以在uniprot中跑blast看看1500的条带是怎么回事，实验遇到困难逐步分析

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
16楼2016-08-12 21:53:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

MMCCBB

新虫 (著名写手)
引用回帖:
13楼: Originally posted by 976592787 at 2016-08-10 22:18:54
原始质粒你转化了跑胶就这样的结果很正常，你去追究这个问题干嘛，搞笑，质粒是环状的dna分子，直接跑胶的话是没法用marker来对应分子量的，你要切了之后才行，而且切了之后最理想情况是全切开，就在8kb左右，如果没 ...

不同结构的质粒，同一种跑胶差别没有这么大

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
17楼2016-08-12 22:04:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

MMCCBB

新虫 (著名写手)
你的实验重要吗？如果可以的话让别的公司合成你需要的目的基因，然后坐质粒构建与定点突变。

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
18楼2016-08-12 22:07:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tanxiaojuan

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

楼主，您的问题解决了吗？是什么原因导致的，能否分享一下你解决这个问题的经验？谢谢啦！
赞一下 回复此楼
19楼2017-07-22 05:26:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 象牙白 的主题更新
192/2返回列表上一页12
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 明天应该可查了！？ +4 chengyan1220 2026-08-23 4/200 2026-08-24 08:47 by gloomy6159
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +16 羊腰板 2026-08-21 17/850 2026-08-23 23:02 by tianxiaochun
[基金申请] 让我中一个面上吧！ +12 大萍1987 2026-08-20 15/750 2026-08-23 20:44 by 大萍1987
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办？ +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 今天放榜吗？ +15 布布和一二 2026-08-19 16/800 2026-08-23 09:55 by 张春生
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +7 且听虎啸 2026-08-17 8/400 2026-08-22 21:55 by 医学老男孩
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +24 yaoyewhu2008 2026-08-20 26/1300 2026-08-22 17:43 by kammury
[基金申请] 人气不行了 +8 fansofjerry 2026-08-21 8/400 2026-08-22 16:30 by zyqchem
[基金申请] 今天基金会出结果吗？20260819 +16 kkkl_v 2026-08-19 17/850 2026-08-22 16:12 by 阿布Abu
[基金申请] 时间戳今天，20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 今日不放榜？网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +16 医学老男孩 2026-08-20 20/1000 2026-08-21 21:13 by Ldrop2023
[基金申请] 看来今天不会放榜了？ +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +7 angus9576 2026-08-17 12/600 2026-08-21 13:38 by weiyin
[基金申请] 我面上完蛋了 +7 且听虎啸 2026-08-20 8/400 2026-08-21 12:31 by 酷酷墨镜
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 时间戳变了，能看出什么问题？ +18 基诺咪客 2026-08-17 23/1150 2026-08-20 17:19 by Godzela
[基金申请] 重要消息，中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] 明天放榜？ +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭