应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 8kb的质粒转化小提质粒后跑胶只有1.5kb条带最亮
192/2返回列表上一页12
查看: 2905  |  回复: 18
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

象牙白

银虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 少文329 at 2016-08-09 19:14:42
质粒的大小本来用线性maker就看不出来，不知道楼主用的什么maker

用的是线性的marker，做个酶切看看。
赞一下 回复此楼
小元，加油！
11楼2016-08-09 20:44:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

vanchy

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
质粒多的话建议把质粒纯化一下再转化
赞一下(1人) 回复此楼
12楼2016-08-10 16:45:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

976592787

木虫 (正式写手)

国家自然科学基金委员会委员长
原始质粒你转化了跑胶就这样的结果很正常，你去追究这个问题干嘛，搞笑，质粒是环状的dna分子，直接跑胶的话是没法用marker来对应分子量的，你要切了之后才行，而且切了之后最理想情况是全切开，就在8kb左右，如果没有全切开就至少三条带，环状dna，线状dna，二聚化质粒等等

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
耻与众草之为伍，何亭亭而独芳！何不为人之所赏兮，深山穷谷委严霜。
13楼2016-08-10 22:18:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

象牙白

银虫 (小有名气)
引用回帖:
13楼: Originally posted by 976592787 at 2016-08-10 22:18:54
原始质粒你转化了跑胶就这样的结果很正常，你去追究这个问题干嘛，搞笑，质粒是环状的dna分子，直接跑胶的话是没法用marker来对应分子量的，你要切了之后才行，而且切了之后最理想情况是全切开，就在8kb左右，如果没 ...

我转化完测序结果不对，当我想要扩增质粒的时候很尴尬。
赞一下 回复此楼
小元，加油！
14楼2016-08-11 14:17:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

korchagin

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

质粒只能通过单酶切后跑电泳才能确定大小；另外优化一下你的提取方法，说不定这里边有些问题
赞一下 回复此楼
15楼2016-08-12 09:57:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

MMCCBB

新虫 (著名写手)
简单的办法切胶回收8000条带的质粒，测序它可以做模板，然后开始定点突变。最后做转化。你可以在uniprot中跑blast看看1500的条带是怎么回事，实验遇到困难逐步分析

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
16楼2016-08-12 21:53:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

MMCCBB

新虫 (著名写手)
引用回帖:
13楼: Originally posted by 976592787 at 2016-08-10 22:18:54
原始质粒你转化了跑胶就这样的结果很正常，你去追究这个问题干嘛，搞笑，质粒是环状的dna分子，直接跑胶的话是没法用marker来对应分子量的，你要切了之后才行，而且切了之后最理想情况是全切开，就在8kb左右，如果没 ...

不同结构的质粒，同一种跑胶差别没有这么大

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
17楼2016-08-12 22:04:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

MMCCBB

新虫 (著名写手)
你的实验重要吗？如果可以的话让别的公司合成你需要的目的基因，然后坐质粒构建与定点突变。

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
18楼2016-08-12 22:07:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tanxiaojuan

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

楼主，您的问题解决了吗？是什么原因导致的，能否分享一下你解决这个问题的经验？谢谢啦！
赞一下 回复此楼
19楼2017-07-22 05:26:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 象牙白 的主题更新
192/2返回列表上一页12
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 河北省自然科学基金 +5 Peterchao 2026-05-18 8/400 2026-05-24 11:58 by 晓晓爱翠翠
[考博] 云南大学材料与能源学院解琳课题组钙钛矿博士招生 +4 光伏爱好者 2026-05-17 7/350 2026-05-24 10:20 by 光伏爱好者
[基金申请] 西安交大新媒学院副院长用撤稿论文结题 +3 bjvtcliu 2026-05-24 5/250 2026-05-24 10:16 by kudofaye
[教师之家] 某211大学教师把个人教师官方主页改成:我跑了我跑了我跑了!官宣跑路！ +4 zju2000 2026-05-21 5/250 2026-05-24 09:35 by songwz
[考博] 26/27申博自荐 10+4 ZXW0202 2026-05-22 9/450 2026-05-24 08:47 by bjvtcliu
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 hvkbtfonbv 2026-05-23 3/150 2026-05-24 08:01 by 9ps9vgkqva
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 pmo95bazuy 2026-05-23 7/350 2026-05-24 06:35 by fpo5ljpv91
[基金申请] 揭秘青基评审内幕：几个A才能顺利中标 +3 国自然国社科中 2026-05-23 4/200 2026-05-23 15:37 by 2000zf36392
[基金申请] 青B发送上会通知了吗 +5 chemBioBro 2026-05-22 7/350 2026-05-23 12:35 by zhuifengzhy
[考博] 博士申请 +3 焦晓明 2026-05-21 3/150 2026-05-23 11:26 by mlc840311
[论文投稿] 投稿求助，期刊 +4 希冀，有书读 2026-05-20 8/400 2026-05-22 10:16 by 希冀，有书读
[文学芳草园] 献血感触 +7 呀呀好傻 2026-05-19 13/650 2026-05-21 20:15 by 呀呀好傻
[基金申请] 面上本子正文33页，违规吗？会被低分嘛？ +14 1234567wang 2026-05-17 16/800 2026-05-21 17:58 by 脆脆的饼干
[基金申请] 国自然评分 +4 无名者登山 2026-05-20 5/250 2026-05-21 16:35 by swuq
[基金申请] 国自然上会要求 +7 无名者登山 2026-05-18 11/550 2026-05-21 15:50 by draco1987
[基金申请] 提交了我也来说说感想 +9 fummck 2026-05-20 10/500 2026-05-21 14:17 by draco1987
[有机交流] 反应很差，大量原料没有反应 5+3 Mr.Zot 2026-05-19 8/400 2026-05-20 22:19 by Equinoxhua
[考博] 如果工作了想读博，可以边工作边读全日制嘛？ 30+3 铁达火车 2026-05-18 5/250 2026-05-20 09:33 by tfang
[考博] 博士申请 +5 星…… 2026-05-18 6/300 2026-05-18 23:49 by 糊糊涂涂好
[硕博家园] 我在等一个没有答案的答案 +3 Love_MH 2026-05-17 3/150 2026-05-18 02:22 by 竹林孤影
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭