| 查看: 2709 | 回复: 18 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[求助]
8kb的质粒转化小提质粒后跑胶只有1.5kb条带最亮 已有5人参与
|
|||
大家好，我是最近两个月开始做定点突变，目的质粒是8kb，经过几次做单点突变实验在amp平板上一共收集到32个单克隆都送去测序，全都没有信号。于是将测序的样品跑胶发现全是在1.5kb处有最亮的条带。后来慢慢排查这个1.5kb条带怎么产生的，同时将所有枪头等用到的器材全都灭菌一次，并且把转化前的原始质粒也跑一次胶，发现原始质粒里有1.5kb的条带，见图。目前的状况是，我单单对质粒进行转化（没有做点突变）然后小提质粒后跑胶最亮还是1.5kb，拿去测序完全不对。被蒙圈了，求大侠援助. xmc.png |
回复此楼» 猜你喜欢
筑牢营养安全线：以精准检测，护健康基石
已经有0人回复
-
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有262人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
|
简单的办法切胶回收8000条带的质粒，测序它可以做模板，然后开始定点突变。最后做转化。你可以在uniprot中跑blast看看1500的条带是怎么回事，实验遇到困难逐步分析 发自小木虫IOS客户端 |
16楼2016-08-12 21:53:20
2楼2016-08-08 23:10:50
781055707
木虫 (著名写手)
- 应助: 291 (大学生)
- 金币: 3118.2
- 散金: 46
- 红花: 19
- 帖子: 2030
- 在线: 579.3小时
- 虫号: 3046113
- 注册: 2014-03-13
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
3楼2016-08-09 08:02:53
闲来小译
金虫 (正式写手)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 1324.8
- 散金: 35
- 红花: 19
- 帖子: 661
- 在线: 231.6小时
- 虫号: 3861458
- 注册: 2015-05-11
- 专业: 生物大分子结构与功能
4楼2016-08-09 08:04:52