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8kb的质粒转化小提质粒后跑胶只有1.5kb条带最亮 已有5人参与
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大家好，我是最近两个月开始做定点突变，目的质粒是8kb，经过几次做单点突变实验在amp平板上一共收集到32个单克隆都送去测序，全都没有信号。于是将测序的样品跑胶发现全是在1.5kb处有最亮的条带。后来慢慢排查这个1.5kb条带怎么产生的，同时将所有枪头等用到的器材全都灭菌一次，并且把转化前的原始质粒也跑一次胶，发现原始质粒里有1.5kb的条带，见图。目前的状况是，我单单对质粒进行转化（没有做点突变）然后小提质粒后跑胶最亮还是1.5kb，拿去测序完全不对。被蒙圈了，求大侠援助. xmc.png |
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简单的办法切胶回收8000条带的质粒，测序它可以做模板，然后开始定点突变。最后做转化。你可以在uniprot中跑blast看看1500的条带是怎么回事，实验遇到困难逐步分析 发自小木虫IOS客户端 |
16楼2016-08-12 21:53:20
2楼2016-08-08 23:10:50
781055707
木虫 (著名写手)
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3楼2016-08-09 08:02:53
闲来小译
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4楼2016-08-09 08:04:52
