应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 请问我做pcr的时候有条带，但是胶回收的时候怎么没条带了啊
451/1返回列表
查看: 5421  |  回复: 44
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

雨落wang

新虫 (初入文坛)

[交流] 请问我做pcr的时候有条带，但是胶回收的时候怎么没条带了啊

请问我做pcr的时候有条带，但是胶回收的时候怎么没条带了啊？

发自小木虫IOS客户端
回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

小林樱雪

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2016-04-07 17:30:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

sandycool

铁虫 (正式写手)
★
雨落wang(金币+1): 谢谢参与
胶回收操作的问题

发自小木虫Android客户端
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2016-04-08 09:01:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

雨落wang

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 原海亮 at 2016-04-07 18:05:44
你切胶的时候有条带么？如果有，就是回收过程中出问题了

切的时候有啊，回收的时候也按照说明进行的，都做过几次重复了！

发自小木虫IOS客户端
赞一下(1人) 回复此楼
12楼2016-04-08 19:29:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

原海亮

木虫 (著名写手)
★
雨落wang(金币+1): 谢谢参与
你切胶的时候有条带么？如果有，就是回收过程中出问题了

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
3楼2016-04-07 18:05:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

屋檐下的等待

新虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
回收没有的肯定是回收过程的问题了

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
7楼2016-04-08 09:07:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

仇峰12306

铁虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
回收之后没有嘛？是不是试剂盒污染了
赞一下 回复此楼
8楼2016-04-08 09:10:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

310013

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
楼主确定你看到的是条带而不是某些非特异性的东西？不是每个可以看到的 都是核酸条带
赞一下 回复此楼
9楼2016-04-08 12:26:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

松风山人

铜虫 (小有名气)
胶回出了问题

发自小木虫Android客户端
回复此楼
10楼2016-04-08 12:36:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

781055707

木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你用的是PET系列吧，我一般切4管50UL的体系，胶回收后跑电泳才勉强看得见。
赞一下 回复此楼
11楼2016-04-08 14:13:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

雨落wang

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by sandycool at 2016-04-08 09:01:09
胶回收操作的问题

是按说明书进行的啊

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
13楼2016-04-08 19:29:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

雨落wang

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 仇峰12306 at 2016-04-08 09:10:24
回收之后没有嘛？是不是试剂盒污染了

新买的盒子啊

发自小木虫IOS客户端
回复此楼
14楼2016-04-08 19:30:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

雨落wang

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 310013 at 2016-04-08 12:26:38
楼主确定你看到的是条带而不是某些非特异性的东西？不是每个可以看到的 都是核酸条带

就是最下面这条最亮的条带啊
请问我做pcr的时候有条带，但是胶回收的时候怎么没条带了啊



发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
15楼2016-04-08 19:33:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

雨落wang

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
11楼: Originally posted by 781055707 at 2016-04-08 14:13:33
你用的是PET系列吧，我一般切4管50UL的体系，胶回收后跑电泳才勉强看得见。

上面没说体系啊，就是用的天根的试剂盒

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
16楼2016-04-08 19:35:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

原海亮

木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
12楼: Originally posted by 雨落wang at 2016-04-08 19:29:12
切的时候有啊，回收的时候也按照说明进行的，都做过几次重复了！
...

你那条带浓度太低了，pcr特异性也不好，先把pcr产物浓度提高一下

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
17楼2016-04-08 22:38:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shx0743

新虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
胶回收之前条带亮么，我以前粗略算过，胶回收效率只有20％，如果你胶回收的带子就不是很明显，那么回收回来的可能性不大！

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
18楼2016-04-08 22:56:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

雨落wang

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
17楼: Originally posted by 原海亮 at 2016-04-08 22:38:10
你那条带浓度太低了，pcr特异性也不好，先把pcr产物浓度提高一下
...

请问浓度怎么提高啊？

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
19楼2016-04-08 22:56:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

雨落wang

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
18楼: Originally posted by shx0743 at 2016-04-08 22:56:16
胶回收之前条带亮么，我以前粗略算过，胶回收效率只有20％，如果你胶回收的带子就不是很明显，那么回收回来的可能性不大！

条带只有这么亮
请问我做pcr的时候有条带，但是胶回收的时候怎么没条带了啊-1



发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
20楼2016-04-08 22:59:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunqx

木虫 (著名写手)
有带较弱

发自小木虫Android客户端
回复此楼
21楼2016-04-08 23:00:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

雨落wang

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
21楼: Originally posted by sunqx at 2016-04-08 23:00:26
有带较弱

就是，加了6微升的模版，50微的体系，

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
22楼2016-04-08 23:04:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunqx

木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你这总共也就二三十ng,能回收回十就了不得了，加三十的水，浓度才三分之一ngul

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
23楼2016-04-08 23:09:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

雨落wang

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
23楼: Originally posted by sunqx at 2016-04-08 23:09:21
你这总共也就二三十ng,能回收回十就了不得了，加三十的水，浓度才三分之一ngul

那我是应该增加模版的量吗？

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
24楼2016-04-08 23:13:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shx0743

新虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
20楼: Originally posted by 雨落wang at 2016-04-08 22:59:35
条带只有这么亮

...

那肯定不行，上样几微？如果是5ul的话，你多做几管吧，摸一下退火温度，看看哪个温度条带更清晰，我每次p，上样3ul，跑出的带子比marker中最亮的条带亮都要做2管以上才会去胶回收

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
25楼2016-04-09 06:16:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

雨落wang

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
25楼: Originally posted by shx0743 at 2016-04-09 06:16:01
那肯定不行，上样几微？如果是5ul的话，你多做几管吧，摸一下退火温度，看看哪个温度条带更清晰，我每次p，上样3ul，跑出的带子比marker中最亮的条带亮都要做2管以上才会去胶回收
...

哦，好的，谢谢

发自小木虫IOS客户端
回复此楼
26楼2016-04-09 08:19:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

雨落wang

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
26楼: Originally posted by 雨落wang at 2016-04-09 08:19:19
哦，好的，谢谢
...

我上样6微，50微体系做的pcr

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
27楼2016-04-09 08:20:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

仇峰12306

铁虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
14楼: Originally posted by 雨落wang at 2016-04-08 19:30:30
新买的盒子啊
...

你用这个回收过别的吗？如果别的没问题，那试剂盒没问题。还有就是看到你的图，感觉你的条带特别暗，你需要的主带大概在多少啊？
赞一下 回复此楼
28楼2016-04-09 09:20:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

黄启秀

新虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我也有同样问题，楼主解决了么～苦恼

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
29楼2016-04-09 09:53:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

雨落wang

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
28楼: Originally posted by 仇峰12306 at 2016-04-09 09:20:40
你用这个回收过别的吗？如果别的没问题，那试剂盒没问题。还有就是看到你的图，感觉你的条带特别暗，你需要的主带大概在多少啊？...

70bp左右

发自小木虫IOS客户端
回复此楼
30楼2016-04-09 10:07:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

雨落wang

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
29楼: Originally posted by 黄启秀 at 2016-04-09 09:53:27
我也有同样问题，楼主解决了么～苦恼

没有，苦恼中

发自小木虫IOS客户端
回复此楼
31楼2016-04-09 10:08:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

雨落wang

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
28楼: Originally posted by 仇峰12306 at 2016-04-09 09:20:40
你用这个回收过别的吗？如果别的没问题，那试剂盒没问题。还有就是看到你的图，感觉你的条带特别暗，你需要的主带大概在多少啊？...

还没回收过其他的

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
32楼2016-04-09 10:08:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

仇峰12306

铁虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
30楼: Originally posted by 雨落wang at 2016-04-09 10:07:44
70bp左右
...

我们回收的片段如果太小的话，我们用的是生工的，说明书上写着需要加异丙醇好像。而且你的片段这么小孩不太亮，如果做PCR方便的话可以多做几个，或者将PCR产物浓缩下试试，切胶点样的时候多点几微升。然后过一个柱子试试。切胶回收效率不管是哪家好像都不太高。
赞一下 回复此楼
33楼2016-04-09 10:46:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

雨落wang

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
33楼: Originally posted by 仇峰12306 at 2016-04-09 10:46:39
我们回收的片段如果太小的话，我们用的是生工的，说明书上写着需要加异丙醇好像。而且你的片段这么小孩不太亮，如果做PCR方便的话可以多做几个，或者将PCR产物浓缩下试试，切胶点样的时候多点几微升。然后过一个柱 ...

Pcr产物怎么浓缩啊？

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
34楼2016-04-09 11:03:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

仇峰12306

铁虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
34楼: Originally posted by 雨落wang at 2016-04-09 11:03:22
Pcr产物怎么浓缩啊？
...

就是你PCR产物洗涤吗?我们之前就是洗涤完了之后加水的时候少加点之前如果是50的话之后就加20-30。但是我们没做过70bp的，我们有200.300的时候一般洗完后加20的水
赞一下 回复此楼
35楼2016-04-09 14:26:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

雨落wang

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
35楼: Originally posted by 仇峰12306 at 2016-04-09 14:26:47
就是你PCR产物洗涤吗?我们之前就是洗涤完了之后加水的时候少加点之前如果是50的话之后就加20-30。但是我们没做过70bp的，我们有200.300的时候一般洗完后加20的水...

哦，好的，谢谢

发自小木虫IOS客户端
回复此楼
36楼2016-04-09 14:49:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小林樱雪

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
送红花一朵
引用回帖:
1楼: Originally posted by 雨落wang at 2016-04-07 17:30:17
请问我做pcr的时候有条带，但是胶回收的时候怎么没条带了啊？

有没有可能是切错了

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
37楼2016-04-09 16:29:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

雨落wang

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
37楼: Originally posted by 小林樱雪 at 2016-04-09 16:29:28
有没有可能是切错了
...

应该不会吧，跟文献上产物大小差不多的位置啊

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
38楼2016-04-09 19:59:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Gao-Rui

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
问题不清楚，说的再细点。是胶回收之后嘛？
赞一下 回复此楼
39楼2016-04-09 22:08:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

781055707

木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
16楼: Originally posted by 雨落wang at 2016-04-08 19:35:35
上面没说体系啊，就是用的天根的试剂盒
...

70BP还胶回收呀，那个膜会过滤掉100BP以下的条带的，连T载体吧，设计下思路看行不行，200BP以下都可能是引物二聚体。
赞一下 回复此楼
40楼2016-04-10 03:37:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

雨落wang

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
40楼: Originally posted by 781055707 at 2016-04-10 03:37:21
70BP还胶回收呀，那个膜会过滤掉100BP以下的条带的，连T载体吧，设计下思路看行不行，200BP以下都可能是引物二聚体。...

啊？这样啊，

发自小木虫IOS客户端
回复此楼
41楼2016-04-10 08:31:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

雨落wang

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
39楼: Originally posted by Gao-Rui at 2016-04-09 22:08:27
问题不清楚，说的再细点。是胶回收之后嘛？

是啊，胶回收之后再跑电泳就没条带了

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
42楼2016-04-10 08:32:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

804371539

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
可能引物二聚体，因为在100bp以下了，回收是有效率的吧，我用的试剂盒有一步是让乙醇挥发干净，不然抑制下游反应。
赞一下 回复此楼
43楼2016-04-10 09:06:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

雨落wang

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
43楼: Originally posted by 804371539 at 2016-04-10 09:06:54
可能引物二聚体，因为在100bp以下了，回收是有效率的吧，我用的试剂盒有一步是让乙醇挥发干净，不然抑制下游反应。

哦，谢谢啊

发自小木虫IOS客户端
回复此楼
44楼2016-04-10 12:02:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wq1727

新虫 (初入文坛)
没回收到DNA吧，
回复此楼
45楼2019-03-29 21:36:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
tan9142楼
2016-04-07 18:05   回复  
雨落wang(金币+1): 谢谢参与
springburn4楼
2016-04-07 18:05   回复  
雨落wang(金币+1): 谢谢参与
Jameskelly5楼
2016-04-07 18:23   回复  
雨落wang(金币+1): 谢谢参与
相关版块跳转 我要订阅楼主 雨落wang 的主题更新
451/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +7 图啦图啦 2026-08-24 8/400 2026-08-24 22:00 by maomao_da
[论文投稿] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 0XLacIJUOj8D 2026-08-24 3/150 2026-08-24 21:59 by BZKMTicpDhFj
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑，不妨来听听这首《基金之外》 +6 scalable 2026-08-24 6/300 2026-08-24 20:28 by 苦寒来香
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +21 koalala 2026-08-24 24/1200 2026-08-24 19:25 by 家与远方
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +13 kulium 2026-08-21 16/800 2026-08-24 16:27 by superceng
[基金申请] 今日不放榜？网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +17 医学老男孩 2026-08-20 21/1050 2026-08-24 14:21 by refreshing11
[基金申请] 估计是周四 +4 archvillain 2026-08-18 4/200 2026-08-24 13:53 by zzuzxg
[基金申请] 让我中一个面上吧！ +13 大萍1987 2026-08-20 16/800 2026-08-24 10:23 by 太傻了
[基金申请] 放榜前的不淡定 20+4 snowwithsea 2026-08-19 17/850 2026-08-24 10:20 by echo8914667
[基金申请] 科研孤儿太难了 +18 我4大白菜 2026-08-20 19/950 2026-08-24 09:47 by 凯恩广盛催化分�
[基金申请] 什么时候开奖？ +10 CrisMessi 2026-08-18 11/550 2026-08-24 06:50 by 开心的小狮子
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +4 process2012 2026-08-23 5/250 2026-08-23 19:58 by jurkat.1640
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办？ +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 今天基金会出结果吗？20260819 +16 kkkl_v 2026-08-19 17/850 2026-08-22 16:12 by 阿布Abu
[基金申请] 时间戳今天，20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[论文投稿] 投稿咨询 +5 wwm09 2026-08-17 7/350 2026-08-21 10:11 by 期刊论文帮手
[基金申请] 重要消息，中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] 明天放榜？ +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭