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voidecho

新虫 (初入文坛)

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专业: 生物大分子结构与功能

[求助] 引物设计问题求助已有5人参与

我在NCBI上设计了一对引物其中反向引物为：AATGGGTCCTCCTCCTCCTC TCC重复太多，会不会对PCR有影响，求助！

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1楼 2016-03-29 11:14:38

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pond

铜虫 (初入文坛)

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专业: 生物大分子结构与功能

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

当然有影响了！会发生这对引物之间配对，那样就p不出来了

6楼2016-03-30 16:23:58

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查看全部 9 个回答

mlxmiao

木虫 (著名写手)

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专业: 园艺学与植物营养学

做了再说

发自小木虫Android客户端

2楼2016-03-29 14:18:28

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汪浩的良

新虫 (初入文坛)

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【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
voidecho: 金币+2 2016-04-01 21:59:57

退火温度有点高，不过应该问题不大，可以先试试梯度PCR，找到合适的退火温度。

3楼2016-03-29 15:03:25

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卡维斯

金虫 (正式写手)

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
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voidecho: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2016-04-01 21:59:41

理论上是这样的，如果米有合适的你可以试试这对引物，如果退火温度比较高可以两步法，退火延伸合并；也可以做个touchdown程序。

4楼2016-03-29 16:58:30

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